酸化・窒素化ストレスによる嗅粘膜障害-気道リモデリングの嗅粘膜分泌異常の解明-

氧化和硝化应激引起的嗅粘膜损伤 - 阐明与气道重塑相关的嗅粘膜分泌异常 -

• 批准号: 21K09615
• 负责人: 春名 眞一
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Dokkyo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09615/
• 关键词: 嗅粘膜; ボーマン腺; 一酸化窒素; 糖蛋白; リモデリング; 酸化窒素化ストレス; 好酸球性副鼻腔炎; NO; 気道リモデリング; 嗅粘膜障害; 酸化・窒素化ストレス; 嗅粘膜分泌

喘息合併好酸球性副鼻腔炎の気道リモデリングの関与による嗅粘膜分泌異常を証明する目的で、人好酸球性副鼻腔炎の嗅粘膜と呼吸粘膜とのニトロチロシン（3-NT）の発現を検討した。その結果、呼吸粘膜上では著明な好酸球性浸潤とともに上皮細胞障害、胚細胞増勢が見られ、著明なリモデリングであることが観察された。嗅粘膜では好酸球浸潤は少なく、基底細胞肥厚も軽度であった。嗅粘膜上でのECP, MBPの発現は少ないが、ボーマン腺の増勢が認められConAの発現が観察された。副鼻腔粘膜前部と後部の好酸球数と3-NTの発現を比較すると、後部で優位に好酸球数と3-NTの発現を認めた。マウス喘息リモデリングモデルを作製し、嗅粘膜糖蛋白の分布とNOの変化を比較する目的でマウスリモデリングのモデルの作製を試みた。BALB/cマウスの腹腔内にovalalbumin(0VA)4μgを２回注入する。慢性モデルを作製するために１７日から３７日までOVAを毎日吸入させて４０日目に屠殺し、リモデリングモデルを作製した。鼻腔粘膜には、多数の好酸球浸潤が観察され、上皮細胞剥奪、杯細胞と基底膜肥厚が認められリモデリングの状態が認められた。一方、嗅粘膜でも呼吸粘膜ほどではないが軽度の好酸球浸潤、上皮細胞障害、基底膜肥厚が観察された。また粘液線のボーマン腺の増勢も観察され、分泌亢進が予想された。レクチン免疫染色にてConA, SNAの発現があり、リモデリング状態の粘液分泌の変化が示唆された。嗅粘膜の細胞培養はマウスの嗅粘膜上皮と繊維芽細胞や脳アストログリアの再構成による嗅粘膜の三次元培養に上皮細胞の分化を支持すると言われるVitamin A 加無血清培地と血清培地にて試みた。培養細胞に対して種々のcytokeratin抗体や抗Neurafilament抗体を用い嗅上皮であることを同定できた。

为了证明嗜酸细胞性鼻窦炎并发哮喘时气道重塑参与导致嗅粘膜分泌异常，我们对硝基酪氨酸（3-NT）对人嗜酸细胞性鼻窦炎嗅粘膜和呼吸道粘膜的表达进行了研究。结果，在呼吸道粘膜上观察到显着的嗜酸性粒细胞浸润、上皮细胞损伤和生殖细胞增殖，表明显着的重塑。嗅粘膜有少量嗜酸性粒细胞浸润，基底细胞轻度肥大。尽管嗅粘膜ECP和MBP表达较低，但观察到Bowman腺活性并观察到ConA表达。当我们比较鼻窦粘膜前部和后部的嗜酸性粒细胞数量和3-NT的表达时，我们发现后部的嗜酸性粒细胞数量和3-NT的表达占主导地位。我们建立了小鼠哮喘重塑模型，并尝试建立小鼠重塑模型来比较嗅粘膜糖蛋白的分布和NO的变化。 BALB/c小鼠腹腔注射4μg卵白蛋白（0VA）两次。为了创建慢性模型，从第 17 天到第 37 天每天吸入 OVA，并在第 40 天处死以创建重塑模型。鼻粘膜可见大量嗜酸性粒细胞浸润，上皮细胞缺失、杯状细胞和基底膜增厚，提示处于重塑状态。另一方面，嗅粘膜有轻度嗜酸性粒细胞浸润、上皮细胞损伤和基底膜增厚，但不如呼吸道粘膜严重。此外，观察到粘液线中鲍曼腺的活动增加，表明分泌增加。凝集素免疫染色显示 ConA 和 SNA 的表达，表明重塑过程中粘液分泌的变化。嗅粘膜细胞培养是在嗅粘膜三维培养中进行的，通过在添加维生素A的无血清培养基和血清培养基中重建小鼠嗅粘膜上皮、成纤维细胞和脑星形胶质细胞来进行，据说这些细胞支持分化我尝试过的上皮细胞。在培养细胞上使用各种细胞角蛋白抗体和抗神经丝抗体，我们能够将它们识别为嗅上皮。

项目成果

A review of current biomarkers in chronic rhinosinusitis with or without nasal polyps.

慢性鼻窦炎伴或不伴鼻息肉的当前生物标志物综述。

• DOI: 10.1080/1744666x.2023.2200164
• 发表时间: 2023
• 作者: Nakayama T; Haruna S
• 通讯作者: Haruna S

Inflammatory molecular entotypes of nasal polyps derived from White and Japanese populations

白人和日本人群鼻息肉的炎症分子实体型

• 发表时间: 2022
• 作者: Nakayama T; Haruna S; et al
• 通讯作者: et al

A Phase II, Multicenter, Randomized, Placebo-Controlled Study of Benralizumab, a Humanized Anti-IL-5R Alpha Monoclonal Antibody, in Patients With Eosinophilic Chronic Rhinosinusitis.

Benralizumab（一种人源化抗 IL-5R Alpha 单克隆抗体）在嗜酸性粒细胞性慢性鼻窦炎患者中的 II 期、多中心、随机、安慰剂对照研究。

• DOI: 10.1177/19458924211009429
• 发表时间: 2021
• 作者: Takabayashi T; Asaka D; Okamoto Y; et al.
• 通讯作者: et al.

A review of current biomarkers in chronic rhinosinusitis with or without nasal polyps.

慢性鼻窦炎伴或不伴鼻息肉的当前生物标志物综述。

• DOI: 10.1080/1744666x.2023.2200164
• 发表时间: 2023
• 作者: Nakayama T; Haruna S
• 通讯作者: Haruna S

Dupilimab improves eosinophilic otitis media associated with eosinophilic chronic rhinosinusitis

Dupilimab 可改善与嗜酸性慢性鼻窦炎相关的嗜酸性中耳炎

• DOI: 10.37796/2211-8039.1237
• 发表时间: 2023
• 作者: Nakashima D; Haruna S; et al.
• 通讯作者: et al.