Development of a innovative combination therapy of hyperthermia and immune checkpoint inhibitors

开发热疗和免疫检查点抑制剂的创新联合疗法

基本信息

批准号：
21K08749
负责人：
佐野彰彦
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08749/
关键词：
HSP110 PD-L1 Luciferase assay Hyperthermia luciferase assay 免疫チェックポイント阻害剤温熱療法

项目摘要

実験計画1)　胃癌切除検体における免疫チェックポイントタンパク、HSP発現評価：治癒切除を行った臨床検体198症例について、免疫染色にてHSP110発現を検討した。核内におけるHSP110高発現群は、低発現群と比較し、有意に予後不良であった。臨床病理学的因子との検討では、腫瘍径、腹膜播種の有無、リンパ節転移の有無、分化度との相関は認めなかったが、病理学的な静脈侵襲の有無とHSP110発現に有意な相関がみられた。リンパ球マーカー(CD8)との相関は認めなかった。PD-L1発現とHSP110発現は統計学的に有意な相関がみられた。実験計画2)　細胞株を用いた温熱治療の意義の検証：GeneX抑制細胞株における温熱治療の意義の検討として、TE8細胞株およびHCT116細胞株を用い、温熱およびGene X抑制による細胞増殖の抑制が確認され、Gene X抑制と温熱治療を併用することにより、有意に増殖が抑制された結果が得られた。また、膵癌細胞株であるSUIT2のCCK8アッセイによるGene Y抑制と温熱感受性の変化に対する検討では、Gene Y抑制により温熱治療の感受性が増強することが確認された。実験計画3)　担癌モデルを用いた動物実験による検証：担癌マウスを用いた動物実験に対して、Hot Plate Methodを用いた温熱療法を実施することで、Tumor volumeの有意な減少がみられることが確立出来た。胃癌腹膜播種モデルにおける腹腔内温熱加療の意義について、ルシフェラーゼアッセイを用いた腹膜播種モデルマウスによる定量的評価が可能となることが予備実験として確認出来ている。

实验计划1）胃癌切除标本中免疫检查点蛋白和HSP表达的评价：通过免疫染色检测198例接受根治性切除的临床标本中HSP110的表达。细胞核中HSP110高表达组的预后明显差于低表达组。在检查临床病理因素时，肿瘤直径、有无腹膜播散、有无淋巴结转移、分化程度之间未发现相关性，但有无病理性静脉侵犯与HSP110之间存在显着相关性。的表情。未观察到与淋巴细胞标记物 (CD8) 的相关性。 PD-L1 表达和 HSP110 表达之间观察到统计学上显着的相关性。实验设计2)使用细胞系验证热疗的意义：为了检查热疗在基因中的意义这被证实，并且通过组合基因X抑制和热疗法，获得了增殖被显着抑制的结果。此外，在使用胰腺癌细胞系 SUIT2 的 CCK8 测定检查基因 Y 抑制和热敏感性变化时，证实基因 Y 抑制增强了对热疗的敏感性。实验设计3）通过使用荷瘤模型的动物实验进行验证：在使用荷瘤小鼠的动物实验中，通过使用热板法进行热疗，观察到肿瘤体积显着减小。初步实验证实，腹腔热疗在胃癌腹膜播散模型中的重要性可以使用荧光素酶测定的腹膜播散模型小鼠进行定量评估。