The investigation of innovative methods for antibody-mediated rejection after kidney transplantation

肾移植后抗体介导排斥反应创新方法的研究

• 批准号: 21K08666
• 负责人: 今村 亮一
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Nagasaki University (2022)Osaka University (2021)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08666/
• 关键词: 抗体関連型拒絶反応; 腎移植後; ペプチド; バイオマーカー; 質量分析; BLOTCHIP-MS; 腎廃絶; 腎移植; 慢性抗体関連型拒絶反応; ドナー特異的抗体; ペプチド定量

腎移植後抗体関連型拒絶反応(antibody-mediated rejection, 以下AMR)は抗ドナー抗体(Donor-specific antibody, 以下DSA)の産生により惹起されることが知られている、AMRは発症してしまえば十分な治療法がなく、AMR発症直前または直後の段階で血中のDSA産生を確認し、治療介入することが重要である。一方、早期では産生されたDSAは移植腎に吸着し血中を循環しないため、その有無を同定することが極めて困難である。従って血中DSA産生を早期に確認しうる新たなバイオマーカーの確立が求められている。我々はBLOTCHIP-MS法を用いて、疾患が発症したことにより血中に放出されるペプチドを同定することにより、DSA産生やAMRの診断にも応用が可能か検討した。なお、本手法はすでに妊娠高血圧および大腸癌のモニタリング方法として報告されている。我々は腎移植患者の血清のうち、①DSA(+)AMR(+)例、①DSA(+)AMR(-)例、①DSA(-)AMR(-)例をランダムに抽出し、特異的ペプチド発現の有無を測定した。その結果、DSA産生時はFibrinogen alpha chainが減少し、Kininogen1が増加することが確認できた。また後者に関してはAMRが発症していないときは増加するが、発症した時点で減少に転ずることが確認できた。（前者はAMR発症にかかわらず、DSA産生にて減少が持続した。）つまりこの２つのペプチドを測定することにより、AMR発症直前のearly phaseまたはAMR発症後のactivation phaseの確認もできることが証明され、AMR発症早期診断のバイオマーカーとなりうることを見出した。我々はこの結果を検証するため、現在validation study群においてさらに症例数を追加し、解析を行っている。

已知肾移植后抗体介导的排斥反应 (AMR) 是由抗供者特异性抗体 (DSA) 的产生引起的，由于没有适当的治疗方法，因此在移植前确认血液中 DSA 的产生并进行干预非常重要。或出现 AMR 后。另一方面，在早期阶段，DSA产生的物质吸附在移植肾上，并不在血液中循环，因此很难识别其存在与否。因此，需要建立一种能够快速确认血液DSA产生的新生物标志物。我们使用 BLOTCHIP-MS 方法来鉴定疾病发作时释放到血液中的肽，并研究其是否可以应用于 DSA 产生和 AMR 的诊断。请注意，该方法已被报道为监测妊娠高血压和结直肠癌的方法。我们从肾移植患者的血清中随机抽取①DSA(+)AMR(+)例、①DSA(+)AMR(-)例、①DSA(-)AMR(-)例，并检测特异性肽的表达情况。测量存在或不存在。结果证实，在 DSA 产生过程中，纤维蛋白原 α 链减少，激肽原 1 增加。关于后者，我们证实，当 AMR 未出现时，该值会增加，但一旦 AMR 出现，该值就会开始减少。 （对于前者，无论 AMR 是否发生，DSA 产量都会持续减少。）换句话说，已经证明，通过测量这两种肽，可以确认 AMR 发生或激活之前的早期阶段。我们发现它可以作为 AMR 发病早期诊断的生物标志物。为了验证这一结果，我们目前正在向验证研究组添加更多案例并进行分析。