ヒト化マウスによるドナー特異的抗体産生免疫プロファイリングの解明と個別化医療

使用人源化小鼠阐明供体特异性抗体产生免疫分析和个性化医疗

• 批准号: 21K08632
• 负责人: 野田 貴幸
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Aichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08632/
• 关键词: B細胞培養; ヒト化マウス; HLA; DSA; レパトア

今年度はde novoドナー特異的HLA抗体(DSA)産生を主とする慢性抗体関連型拒絶反応（CAMR）の克服を目的として、B細胞活性化機構の解明のためのツールとなるDSA産生ヒト化マウスの作製を中心として行った。DSA産生ヒト化マウスの作製において、健常人PBMC移入では一部HLA抗体の検出が可能となったが、大半はnonDSAであり、DSAは僅かであった。それに対し、移植患者PBMCでは血清中DSAと同様のアリルが検出でき、nonDSAは少なかった。しかし、ともにマウス体内では経時的にT細胞（CD3陽性細胞）の急増がみられ、35日目あたりからGVHDの発症が起こり、50日程度で死亡した。DSA産生の評価ツールとして使用するためには、マウスの長期生存は必須である。GVHDの発症は著増するT細胞、特にナイーブT細胞に起因すると考えるため、磁気CD45RAビーズを用いて分離し、PBMC、ナイーブT細胞、PBMCからナイーブT細胞を除いた3群でGVHDの発症時期およびマウスの生存期間を比較検討した。PBMC投与群を基準として、PBMCからナイーブT細胞を除いた群ではGVHDの発症時期、生存期間は延長したが、著明な差はなかった。ナイーブT細胞のみの投与群では、早期のGVHD発症を予想したが、こちらも著明な差はみられなかった。本検討は標本数が少なかったため、さらなる例数を重ねる必要があると考えられる。

今年，为了克服主要由供体特异性 HLA 抗体 (DSA) 产生引起的慢性抗体相关排斥反应 (CAMR)，我们将开发产生 DSA 的人源化，这将作为阐明B细胞激活机制的主要重点是创建小鼠。在产生DSA的人源化小鼠的生产中，通过转移健康个体的PBMC可以检测到一些HLA抗体，但大多数是非DSA的，仅检测到少量的DSA。相比之下，在移植患者的PBMC中检测到与血清DSA中发现的相似的等位基因，并且nonDSA较低。然而，在这两只小鼠中，T 细胞（CD3 阳性细胞）随着时间的推移迅速增加，GVHD 在第 35 天左右出现，导致第 50 天左右死亡。小鼠的长期存活对于用作 DSA 生产的评估工具至关重要。因为我们认为GVHD的发病是由T细胞，尤其是幼稚T细胞显着增加引起的，所以我们使用CD45RA磁珠将它们分离，并分三组分析GVHD的发病：PBMC、幼稚T细胞和排除幼稚T细胞的PBMC比较了小鼠的 T 细胞和存活时间。与PBMC给药组相比，从PBMC中去除初始T细胞的组中，GVHD的发病时间和生存时间延长，但没有显着差异。我们预计仅接受初始 T 细胞的组会出现较早的 GVHD，但这里也没有观察到显着差异。由于本研究样本数量较少，因此认为有必要增加样本数量。