CD8制御性T細胞による臓器移植後免疫寛容をめざした革新的細胞移入療法の開発

开发利用CD8调节性T细胞的创新细胞转移疗法以实现器官移植后的免疫耐受

基本信息

批准号：
21K08615
负责人：
野竹剛
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Shinshu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08615/
关键词：
制御性T細胞 CD8 follicular helper T細胞 flowcytometry IRF2 CXCR5 Ly49 免疫寛容臓器移植

项目摘要

本研究では、主に follicular helper T細胞（TFH）を抑制するとされるCD8陽性制御性T細胞（CD8 Treg）の性質に関する基礎的な検討と臓器移植への応用を目指している。過去の報告によると、CD8陽性Tregの細胞表面マーカーとして、Ly49, CD44, PD1, CXCR5といったものがあげられている。我々はこれまでの研究で、転写因子IRF2依存性に存在するLy49陽性CD8陽性T細胞（Ly49陽性T細胞）についての特徴についての検討を行ってきている。そこでまず、IRF2依存性Ly49陽性T細胞がCD8Tregと相同であるとの作業仮設の元に、令和4年度において以下の検討を行った。【検討内容】前年度（R3年度）の検討では、naiveな状態のマウスを用いてLy49陽性T細胞のCD44やPD1, CXCR5の発現の有無について検討したところ、Ly49陽性T細胞にはCD44やPD1は発言しているものの、CXCR5は発現しておらず，すでに報告されているCD8 Tregとはphenotypeが異なっていた。Naiveな状態ではそもそもTFHが存在しない可能性を考え、ペプチドを用いてex vivo刺激を加えたマウスにおいて同検討を行うこととした。【結果】OVAペプチドペプチドを用いたex vivoのTFH刺激系に、purifyしたLy49陽性T細胞を共培養することで，TFHの活性化を抑制し抗体産生量が変化するか検討を行うこととした。しかし、現在ex vivoのTFH刺激系を確立することができていない。このため、Ly49陽性T細胞の有無による抗体産生量の評価にまでは至っていない。【現在の状況】ペプチド刺激の方法が不十分であった可能性を考え、現在刺激方法について条件の検討を行っているところである。

在本研究中，我们旨在对主要抑制滤泡辅助性T细胞（TFH）的CD8阳性调节性T细胞（CD8 Tregs）的特性进行基础研究，并将其应用于器官移植。根据以往的报道，Ly49、CD44、PD1和CXCR5被列为CD8阳性Treg的细胞表面标志物。在我们之前的研究中，我们研究了以依赖于转录因子IRF2的方式存在的Ly49阳性CD8阳性T细胞（Ly49阳性T细胞）的特征。因此，我们在2020财年首先基于IRF2依赖性Ly49阳性T细胞与CD8Treg同源的工作假设进行了以下研究。 [研究内容] 前一年（R3年），我们使用初始小鼠研究了Ly49阳性T细胞上CD44、PD1和CXCR5的表达，但CXCR5不表达，并且表型与之前报道的不同。 CD8 Tregs。考虑到 TFH 在幼稚状态下不存在的可能性，我们决定在用肽离体刺激的小鼠中进行相同的研究。 [结果] 我们决定研究使用 OVA 肽在离体 TFH 刺激系统中共培养纯化的 Ly49 阳性 T 细胞是否会抑制 TFH 激活并改变抗体产生。然而，目前还不可能建立离体 TFH 刺激系统。因此，不可能根据Ly49阳性T细胞的存在或不存在来评估产生的抗体的量。 [现状] 考虑到肽刺激法可能存在不足，我们目前正在研究刺激法的条件。