PIM阻害剤によるHIVタイプ特異的な複製能調節機構の解明

阐明PIM抑制剂调节HIV类型特异性复制能力的机制

• 批准号: 21K08491
• 负责人: 土肥 直哉
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08491/
• 关键词: HIV-1; HIV-2; 遺伝子発現; PIM; 転写; 翻訳; PIM阻害剤; 複製制御

PIMキナーゼは、PIM1、PIM2、PIM3に分類され、各PIMが発現している細胞や組織が異なることが知られている。PIMキナーゼは、転写や細胞周期などを調節する種々の分子を基質としており、細胞の増殖や分化に関与する。昨年度までに、ある種のPIM阻害剤がHIV-1およびHIV-2の感染性を増減させ、これが逆転写など複製前期過程への影響ではなく、HIV遺伝子発現への影響によるものであることを明らかにした。今年度は、まず、PIMがHIVの遺伝子発現を含む複製後期過程に及ぼす影響を解析するため、HEK293T細胞にPIM発現ベクターとプロウイルスクローンのコトランスフェクション実験を行った。その結果、ある種のPIMの過剰発現により、HIV-1およびHIV-2のウイルス産生量が著減することが分かった。また、PIMのキナーゼ活性欠損変異体を用いた同様のコトランスフェクション実験により、ウイルス産生抑制がPIMのキナーゼ活性によるものであることを明らかにした。さらに、これらのウイルス産生量の低下は、ウイルスタンパク質発現量の低下によるものであることも分かった。３つのタイプのPIMの内、２つのPIMがウイルス産生量/タンパク質発現量を抑制するが、これら２つを同時にプロウイルスクローンとコトランスフェクションすると、単独PIM発現よりもさらにウイルス産生量が低下した。タイプの異なるPIMによるウイルス産生抑制は相加的、あるいは、2つのPIMの作用機序は異なり協調的に作用する可能性が示唆された。PIMはタイプにより発現する細胞や組織、その発現量などが異なっており、種々の細胞内イベントに関与することが示唆されているものの、それぞれのPIMの基質など詳細な機構は未解明な点が多い。本研究でウイルス産生量という生物学的な指標を取り入れ、PIMの作用機構を明らかにしていく。

PIM激酶分为PIM1、PIM2和PIM3，已知每种PIM在不同的细胞和组织中表达。 PIM激酶以调节转录和细胞周期的各种分子为底物，参与细胞增殖和分化。在过去的一年里，我们已经证明某些 PIM 抑制剂会增加或减少 HIV-1 和 HIV-2 的感染性，这是由于对 HIV 基因表达的影响，而不是对早期复制过程（如逆转录）的影响。 。今年，我们首先进行了PIM表达载体和前病毒克隆共转染HEK293T细胞的实验，以分析PIM对包括HIV基因表达在内的后期复制过程的影响。结果表明，某些 PIM 的过度表达显着减少了 HIV-1 和 HIV-2 病毒的产生量。此外，使用PIM激酶活性缺陷突变体进行的类似共转染实验表明，病毒产生的抑制是由于PIM激酶活性所致。此外，还发现病毒产生量的减少是由于病毒蛋白表达量的减少所致。在三种类型的PIM中，两种PIM抑制病毒产生/蛋白质表达的量，但是当这两种与原病毒克隆共转染时，产生的病毒量比单独表达PIM时进一步减少。有人提出，不同类型的PIM对病毒产生的抑制是相加的，或者说两种PIM具有不同的作用机制并协同作用。 PIM 表达的细胞和组织及其表达水平因类型而异，尽管有人认为它们参与各种细胞内事件，但详细机制（例如每种 PIM 的底物）仍不清楚。 。在这项研究中，我们将结合生物指标（病毒产生量）来阐明 PIM 的作用机制。

项目成果

HIV-1 Gag-MAにおけるGag前駆体二量体化部位のウイルス学的解析

HIV-1 Gag-MA 中 Gag 前体二聚位点的病毒学分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 駒貴明;小谷治;土肥直哉;近藤智之;横山勝;足立昭夫;佐藤裕徳;野間口雅子
• 通讯作者: 野間口雅子

PIMキナーゼ阻害剤がHIV種特異的に複製に及ぼす影響の解析

PIM激酶抑制剂对HIV物种特异性复制的影响分析

• 发表时间: 2021
• 作者: 駒貴明; 礎光希; 塚田知寿子; 戸梶智耀; 足立昭夫; 野間口雅子; 土肥直哉
• 通讯作者: 土肥直哉

HIV-1遺伝子発現におけるvpr塩基配列の重要性

vpr 核苷酸序列在 HIV-1 基因表达中的重要性

• 发表时间: 2022
• 作者: 土肥直哉;駒貴明;後藤田知里;長坂麻里;近藤智之;足立昭夫;野間口雅子
• 通讯作者: 野間口雅子

PIMキナーゼ阻害剤がHIV種特異的に複製に及ぼす影響の解析

PIM激酶抑制剂对HIV物种特异性复制的影响分析

• 发表时间: 2021
• 作者: 駒貴明; 礎光希; 塚田知寿子; 戸梶智耀; 足立昭夫; 野間口雅子; 土肥直哉
• 通讯作者: 土肥直哉

Major target for UV-induced complete loss of HIV-1 infectivity: A model study of single-stranded RNA enveloped viruses

紫外线诱导 HIV-1 感染性完全丧失的主要目标：单链 RNA 包膜病毒的模型研究

• DOI: 10.3389/fviro.2022.994842
• 发表时间: 2022
• 作者: Koma Takaaki;Doi Naoya;Suzuki Akihiro;Nagamatsu Kentaro;Yasui Takeshi;Yasutomo Koji;Adachi Akio;Minamikawa Takeo;Nomaguchi Masako
• 通讯作者: Nomaguchi Masako