Stromal cell-derived factor1 expression on periodontal ligament cells derived from Down syndrom

唐氏综合症牙周膜细胞上基质细胞衍生因子1的表达

基本信息

批准号：
20K10235
负责人：
浅川剛吉
金额：
$ 2.83万
依托单位：
Showa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は自己治癒能力を高めることによる歯周組織再生医療技術を確立することを目的として、歯周疾患を特徴とするDown症候群患者と健常者の永久歯歯根膜由来細胞の比較解析を行う。無菌的に分離培養した、健常者永久歯歯根膜細胞（pPDL）とDown症候群永久歯歯根膜由来細胞それぞれに (SV40) および (hTERT) の発現ベクターを導入後,G418選択培地にて培養、single cell cloningし、株化永久歯歯根膜由来細胞(STPDL)と株化Down症永久歯歯根膜由来細胞(STPDLDS)を獲得した。獲得した細胞についてSTR解析を行い、オリジナルの細胞起源であることを確認した。STPDLとSTPDLDSは共にSV40 positive hTERT発現の上昇を確認した。また、population doubling levelも80を超えて確認した。SDF-1発現解析の結果、FGF-2を投与後、永久歯歯根膜細胞において24,48時間後には有意にSDF-1αの発現が抑制された。また、Down症歯根膜細胞ではFGF-2の影響を認めなかった。pPDLとDown症候群永久歯歯根膜歯細胞のマイクロアレイ比較解析より、Down症候群永久歯歯根膜歯細胞においてRCAN1の発現の上昇を確認した。本研究結果より獲得したSTPDLDS においてSV40 Positive, hTERTの有意な活性の上昇,Hayflicklimitを超える細胞増殖を認めた。しかし、核型解析より、染色体の倍加を認めた。Down症候群は乳歯から永久歯への交換期遅延など、様々な歯科的特徴を認める。また、進行性の歯周炎は早期に歯を損失してしまう最大の要因ともなっている。21番染色体上にあるDSCR1の活性が亢進すると、血管形成に関するカルシニューリンシグナル経路を阻害することで血管新生を抑制する。これらの歯周炎への影響についての解析を遂行していく。

这项研究旨在通过增加治愈自我修复的能力以及对唐氏综合症患者永久韧带的细胞的比较分析，以牙周疾病和健康个体的特征来建立牙周组织再生医学技术。在引入健康的永久韧带细胞（PPDL）和唐氏综合症的永久性韧带细胞（SV40）和（HTERT）表达载体后，它们是分离的，并在无菌地分离出来，将细胞培养在G418选择性培养基和单细胞克隆中，以获取永久性韧带细胞（STPDL）和唐氏综合征（STPDL）和综合综合征。对获得的细胞进行了STR分析，以确认它们是原始细胞起源。 STPDL和STPDLD都证实了SV40阳性HTERT表达的增加。人口加倍水平也已确认超过80。由于SDF-1表达分析，在给药FGF-2 24,48小时后，SDF-1α表达在永久牙列牙周韧带细胞中显着抑制。此外，在Down的牙周韧带细胞中未观察到FGF-2的作用。 PPDL和唐氏综合症永久性韧带牙周牙齿牙齿牙列细胞的微阵列比较分析证实，唐氏综合症永久牙列牙周牙列的RCAN1表达增加。从这项研究的结果中获得的STPDLD显示，SV40阳性和HTERT的活性显着增加，细胞增殖超过了Hayflick极限。然而，核分型显示染色体翻了一番。唐氏综合症呈现出各种牙齿特征，包括从乳牙到恒牙的延迟替代期。进行性牙周炎也是早期牙齿脱落的最大因素。 DSCR1对21染色体的活性增加通过抑制与血管生成相关的钙调神经蛋白信号传导途径来抑制血管生成。我们将分析这些对牙周炎的影响。

项目成果

期刊论文数量（3）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

不死化ダウン症候群永久歯歯根膜由来細胞のSTR解析

永生化唐氏综合症恒牙牙周膜来源细胞的STR分析

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Tanaka Satoshi;Karibe Hiroyuki;Kato Yuichi;Komatsuzaki Akira;Sekimoto Tsuneo;Shimomura-Kuroki Junko;紀田優和子,浅川剛吉,伏見直子,池田理沙,高橋万莉,新田雅一,上條竜太郎,船津敬弘.
通讯作者：
紀田優和子,浅川剛吉,伏見直子,池田理沙,高橋万莉,新田雅一,上條竜太郎,船津敬弘.

SV40T-Ag およびhTERT遺伝子導入による不死化ダウン症候群歯根膜由来細胞の樹立

通过导入SV40T-Ag和hTERT基因建立永生化唐氏综合症牙周膜来源细胞