亜鉛シグナルと顎骨炎症との関わり:亜鉛シグナルの制御に基づく新しい治療戦略の構築

锌信号与颌骨炎症的关系:基于锌信号调控的新治疗策略的建立

基本信息

  • 批准号:
    20K10101
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.66万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    2020
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2020-04-01 至 2024-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

[骨髄巨核球の亜鉛ホメオスタシスにおけるZip10トランスポーターの役割の検証]マウス巨核球・血小板の分化に係る亜鉛ホメオスタシスでのZip10トランスポーターの役割を検証する目的で,培養巨核球のZip10トランスポーターの発現をノックアウトしその影響を検討した。Zip10flox・Zip10-CreマウスおよびWT(野生型)マウスの両側大腿骨および脛骨から骨髄を採取し,Stem cell factor (SCF)を添加したStemPro34培地にて48時間培養,続いてSCFならびにThrombopoietin (TPO)を加えた同培地にて48時間培養,さらにTPOを加えた同培地にて48時間培養した。BSA濃度勾配にて巨核球画分を分離し同培地に播種後,再終濃度2μMに4-hydroxytamoxifen(4OH-TAM)を加え,4OH-TAM非投与(ethanol投与)群とともに培養し,1,3,8,24時間後に細胞を採取した。トータルRNA抽出,RNA濃度測定,cDNA合成後,Zip10遺伝子発現をRT-qPCR(CFX ConnectリアルタイムPCR解析システム)にて定量解析した。4OH-TAM投与したWTマウス由来巨核球,4OH-TAM投与しないZip10flox・Zip10-Creマウス由来巨核球ならびにWTマウス由来巨核球では,8時間後に出芽し始め,旺盛な胞体突起形成を経て24時間後までに血小板への分化を完了し,それに合わせ8時間後から24時間後にZip10遺伝子発現が顕著に増加していた。一方,4OH-TAM投与したZip10flox・Zip10-Creマウス由来巨核球では血小板への分化がみられず,Zip10遺伝子発現の増加も認められなかった。これらの結果から,巨核球・血小板の分化においてZip10は重要な役割を持つことが示唆された。
[Zip10转运蛋白在骨髓巨核细胞锌稳态中的作用的验证] 为了验证Zip10转运蛋白在与小鼠巨核细胞和血小板分化相关的锌稳态中的作用,我们研究了培养的巨核细胞中Zip10转运蛋白的表达。它出来检查了其效果。从 Zip10flox/Zip10-Cre 小鼠和 WT(野生型)小鼠的股骨和胫骨中收集骨髓,并在补充有干细胞因子(SCF)的 StemPro34 培养基中培养 48 小时,然后加入 SCF 和血小板生成素(TPO)。将细胞在补充有TPO的相同培养基中培养48小时,并在补充有TPO的相同培养基中进一步培养48小时。使用 BSA 浓度梯度分离巨核细胞级分并接种到相同培养基中后,添加 4-羟基他莫昔芬 (4OH-TAM) 至终浓度 2 μM,与未施用的 4OH-TAM(施用乙醇)一起培养)分组。经过总RNA提取、RNA浓度测量和cDNA合成后,使用RT-qPCR(CFX Connect实时PCR分析系统)对Zip10基因表达进行定量分析。来自用4OH-TAM处理的WT小鼠的巨核细胞、来自未用4OH-TAM处理的Zip10flox/Zip10-Cre小鼠的巨核细胞以及来自WT小鼠的巨核细胞在旺盛的细胞突起形成后8小时和24小时后开始萌芽。到那时,已经完成了为血小板的分化,Zip10基因表达在8到24小时后显着增加。另一方面,用4OH-TAM处理的Zip10flox/Zip10-Cre小鼠来源的巨核细胞没有分化成血小板,并且没有观察到Zip10基因表达的增加。这些结果表明,ZIP10在巨核细胞/血小板分化中起重要作用。

项目成果

期刊论文数量(8)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Toward elucidation of histogenesis of salivary gland tumor: Generation of mouse salivary gland tumor model
阐明唾液腺肿瘤的组织发生:小鼠唾液腺肿瘤模型的生成
  • DOI:
    10.20663/iwateshigakukaishi.46.2_106_2
  • 发表时间:
    2021
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Hana Yamaguchi;Miki Hiroi;Kazumasa Mori et al;衣斐美歩,羽金雅登,佐藤泰生,入江太朗
  • 通讯作者:
    衣斐美歩,羽金雅登,佐藤泰生,入江太朗
唾液腺腫瘍組織発生解明にむけて - 唾液腺腫瘍モデルマウスの創出
阐明唾液腺肿瘤的组织发生——唾液腺肿瘤模型小鼠的创建
  • DOI:
  • 发表时间:
    2021
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    藤井 慎介;自見 英治郎;清島 保;衣斐美歩,佐藤泰生,入江太朗
  • 通讯作者:
    衣斐美歩,佐藤泰生,入江太朗
唾液腺腫瘍モデルマウスの創出
小鼠唾液腺肿瘤模型的建立
  • DOI:
  • 发表时间:
    2021
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Oda Yoshiaki;Takasu Nana N.;Ohno Sachi N.;Shirakawa Yukie;Sugimura Mitsutaka;Nakamura Takahiro J.;Nakamura Wataru;衣斐美歩,佐藤泰生,羽金雅登,田中準一,安原理佳,美島健二,入江太朗
  • 通讯作者:
    衣斐美歩,佐藤泰生,羽金雅登,田中準一,安原理佳,美島健二,入江太朗
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  • 通讯作者:
    杉山 芳樹

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  • DOI:
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  • 发表时间:
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  • 作者:
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    $ 2.66万
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    Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)

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    2022
  • 资助金额:
    $ 2.66万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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