新規水疱性類天疱瘡モデルマウスを用いた抗BP230自己抗体の解析

使用新的大疱性类天疱疮小鼠模型分析抗 BP230 自身抗体

基本信息

批准号：
21K08316
负责人：
澤村大輔
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Hirosaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

申請者は，表皮のみでマウスBp230遺伝子が欠損するコンデショナルノックアウトマウスを作成した．そのマウスではBP230の表皮特有ドメインが異物として認識されることを利用して，抗BP230自己抗体産生を可能にし，新しい水疱性類天疱瘡モデルマウスの作成に成功している．そのモデルマウスやそのマウス作成戦略を用いて，抗BP230自己抗体の詳細な解析や抗BP230抗体を有する類天疱瘡の病態解明を行うことが，本研究の目的である．令和3から4年度は, そのモデルマウスにおけるBP230に対する自己抗体の病原性やエピトープの解析を行った. モデルマウスの脾細胞とマウス骨髄腫細胞株を融合し，ハイブリドーマー陽性クローンを得た．その後，陽性クローンのエピトープの解析をペプチドマイクロアレイ法にて行った．さらに, 水疱性類天疱瘡では，外傷や紫外線などによる表皮細胞の破壊が契機となることがあり，それが表皮細胞内にあるBP230の免疫系への暴露となる可能性があると考えられている．我々は予備的な実験で，免疫不全マウスに皮膚潰瘍を形成してからリンパ球を投与すると症状が重症化することを確かめている．そこで，外傷，UVB照射，接触皮膚炎が，モデルマウス誘発や症状の重症化に関与するかを確かめた．さらに, BP230のすべての領域を網羅するリコンビナントペプチドで，ノックアウトマウス免疫し，脾細胞をRag2-/-マウスに投与して，病変の有無を確認した．また, モデルマウスを用いて，ステロイド，IVIG，各種免疫抑制剤の治療効果を検討した．

申请人创造了一种条件性基因敲除小鼠，其中小鼠Bp230基因仅在表皮中被删除。在这些小鼠中，BP230的表皮特异性结构域被识别为异物，使得产生抗BP230自身抗体成为可能，并成功创建了新的大疱性类天疱疮小鼠模型。本研究的目的是利用小鼠模型和小鼠生成策略对抗BP230自身抗体进行详细分析，并阐明具有抗BP230抗体的类天疱疮的病理学。 2021年至2020年，我们分析了小鼠模型中针对BP230的自身抗体的致病性和表位，我们将模型小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系融合，并获得了杂交瘤阳性克隆。然后，使用肽微阵列方法对阳性克隆进行表位分析。此外，在大疱性类天疱疮中，外伤或紫外线导致的表皮细胞的破坏可能是触发因素，并且认为这可能使表皮细胞中的BP230暴露于免疫系统。在初步实验中，我们已经证实，当免疫缺陷小鼠在形成皮肤溃疡后给予淋巴细胞，症状会变得更加严重。因此，我们研究了创伤、UVB照射和接触性皮炎是否与模型小鼠症状的诱发和加重有关。此外，我们用覆盖BP230所有区域的重组肽对敲除小鼠进行免疫，将脾细胞给予Rag2-/-小鼠，并确认病变的存在或不存在。我们还使用模型小鼠研究了类固醇、IVIG 和各种免疫抑制剂的治疗效果。

项目成果

期刊论文数量（3）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

A Case of Possible Concurrence of Dermatitis Herpetiformis and Linear Immunoglobulin A / Immunoglobulin G Bullous Dermatosis.

疱疹样皮炎与线性免疫球蛋白A/免疫球蛋白G大疱性皮肤病可能并发的一例。

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
Minakawa S; Matsuzaki Y; Hashimoto T; Ishii N; Nishie W; Sawamura D.
通讯作者：
Sawamura D.

The pathogeneses of pemphigus and pemphigoid diseases

天疱疮和类天疱疮疾病的发病机制

DOI：
10.1016/j.jdermsci.2021.11.003
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
Ujiie H; Yamagami J; Takahashi H; Izumi K; Iwata H; Wang G; Sawamura D; Amagai M; Zillikens D.
通讯作者：
Zillikens D.

A 1,035-Subject Study Suggesting a History of Bone Fracture as a Possible Factor Associated with the Development of Anti-BP180 Autoantibodies.

一项针对 1,035 名受试者的研究表明，骨折史是与抗 BP180 自身抗体的发展相关的一个可能因素。

DOI：
10.1016/j.jid.2021.11.028
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Mai Y; Izumi K; Sawada K; Akasaka E; Mai S; Sawamura D; Ihara K; Nakaji S; Nishie W.
通讯作者：
Nishie W.