Investigation of the role of NFAT5 in the regulation of renal interstitial microenviroment and blood pressure

NFAT5对肾间质微环境及血压调节作用的研究

基本信息

批准号：
21K08280
负责人：
泉裕一郎
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08280/
关键词：
NFAT5 腎尿細管高血圧免疫応答

项目摘要

本研究は、腎臓の尿細管細胞の浸透圧応答転写因子NFAT5 (nuclear factor of activated T-cells 5)を介した、血圧調節の機序を明らかにすること、また、食塩感受性高血圧への関与を明らかにすることを目標としている。本年度は、尿細管細胞内NFAT5の、腎間質の免疫応答における役割を明らかにすることを目的に実験を進めた。Basal condition下に腎髄質を用いて行ったTSS-Seqにより発現変動した遺伝子群について、clusterProfilerによるGene Ontology解析の後、さらにSTRINGを用いて遺伝子間の相互作用の解析を行ったところ、NFAT5KOマウスで発現が増加したinnate immune responseに関する遺伝子群の解析により、特にcytokine production, lymphocyte activation, macrophage activation, monocyte chemotaxisの活性化が、さらにadaptive immune responseに関する遺伝子群の解析により、T-cell activation, B-cell activation, regulation of cytokine productionが活性化していることが示唆された。また、TSS-Seqの結果の裏付けのために行ったreal time PCR法にて、KOマウスにおいて免疫応答に関連する遺伝子群（Ccl2やTNF-a、IL-1bやF4/80、TGF-bなど）の発現増加と、高食塩食を与えることでこれらの発現がさら増加する傾向を確認した。さらに、本研究に付随して交付を受けた独立基盤形成支援によりセットアップした、インキュベーター内設置の生細胞観察顕微鏡を用いて、培養細胞内に発現させたGFPタグ化NFAT5蛋白の動態観察を可能とする実験系を確立した。

本研究旨在阐明肾小管细胞中渗透性转录因子NFAT5（活化T细胞核因子5）介导的血压调节机制，并探讨其在盐敏感性高血压中的参与作用。今年，我们进行了实验，旨在阐明肾小管细胞中的NFAT5在肾间质免疫反应中的作用。使用 clusterProfiler 进行基因本体分析后，我们进一步使用 STRING 分析了在基础条件下使用肾髓质进行的 TSS-Seq 表达发生改变的基因组之间的相互作用，对表达增加的先天免疫反应相关的基因组进行了分析。细胞因子产生的激活、淋巴细胞激活、巨噬细胞激活和单核细胞趋化性与适应性免疫反应特别相关。对与反应相关的基因组的分析表明，T 细胞激活、B 细胞激活和细胞因子产生的调节被激活。此外，利用实时PCR方法确认TSS-Seq结果，我们检测到了一组与免疫反应相关的基因（Ccl2、TNF-a、IL-1b、F4/80、TGF-b等）。）在 KO 小鼠中），并且当喂食高盐饮食时这些表达有进一步增加的趋势。此外，使用安装在培养箱中的活细胞观察显微镜（该显微镜是在与本研究相关的独立基础设施支持的支持下设置的），可以观察培养细胞中表达的 GFP 标记的 NFAT5 蛋白的动态。这样做的实验系统。

项目成果

期刊论文数量（28）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

A case of chyluria with nephrotic-range proteinuria caused by lymphatic malformation, leading to a diagnosis of Klippel-Trenaunay syndrome

淋巴管畸形引起乳糜尿伴肾病范围蛋白尿一例，诊断为 Klippel-Trenaunay 综合征

DOI：
10.1007/s13730-022-00747-6
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
1
作者：
Izumi Yuichiro;Date Ryosuke;Mizumoto Teruhiko;Nakagawa Terumasa;Kakizoe Yutaka;Adachi Masataka;Kuwabara Takashige;Mukoyama Masashi
通讯作者：
Mukoyama Masashi

Camostat mesilate, a serine protease inhibitor, exerts aquaretic effects and decreases urinary exosomal AQP2 levels

卡莫司他甲磺酸盐是一种丝氨酸蛋白酶抑制剂，具有促水作用并降低尿外泌体 AQP2 水平

DOI：
10.1016/j.jphs.2022.09.003
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
3.5
作者：
Kakizoe Yutaka;Nakagawa Terumasa;Iwata Yasunobu;Deng Qinyuan;Adachi Masataka;Miyasato Yoshikazu;Nakagawa Miyuki;Nagayoshi Yu;Nishiguchi Kayo;Narita Yuki;Izumi Yuichiro;Kuwabara Takashige;Tomita Kimio;Kitamura Kenichiro;Mukoyama Masashi
通讯作者：
Mukoyama Masashi

腎集合尿細管間在細胞のアルドステロンによる尿中酸排泄機序の検討

肾集合管间质细胞醛固酮排尿酸机制的研究