リアノジン受容体を標的とした小胞体Caリーク制御による新しい腎臓病治療法の開発

通过靶向兰尼碱受体控制内质网钙渗漏，开发一种新的肾脏疾病治疗方法

• 批准号: 21K08279
• 负责人: 内海 仁志
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08279/
• 关键词: 慢性腎臓病; 小胞体ストレス; リアノジン受容体; RyR安定化薬; 糸球体足細胞

小胞体（ER）は細胞内のタンパク質組み立て工場であり、細胞内カルシウムイオン（Ca）制御は重要な役割を果たす。細胞に過度のストレスがかかると、ER内で不良タンパク質が蓄積するERストレス状態となり細胞死を引き起こし、ERストレス病を発症する。ERのCa放出チャネルであるリアノジン受容体（RyR2）の機能異常が、ERストレスを誘導し、慢性腎臓病（CKD）もERストレス病であり、RyR2の安定化がCKDの進展を抑制すると仮説を立てた。リアノジン受容体（RyR2）構造安定化 {①薬理的介入：RyR安定化薬の慢性投与 ②遺伝的介入：RyR2遺伝子改変（RyR2-V3599Kノックイン→カルモジュリン（CaM）がRyR2に高親和性に結合)} による慢性腎臓病（CKD）の進展抑制を5/6腎臓摘出術（Nx）したマウスCKDモデルで検証した。5/6腎臓摘出術後の野生型（WT）マウスでは、糸球体濾過量（GFR）は低下し糸球体は硬化した。しかし、RyR安定化薬を慢性投与したWTマウスとRyR2-V3599Kノックインマウスに5/6腎臓摘出術を行っても、GFRは低下せずに糸球体の硬化が抑制された。さらに、腎細胞のERストレス応答を培養足細胞・尿細管細胞において検証した。足細胞・尿細管細胞においてRyRとCaMの共局在を確認し、RyR2構造安定化（薬理的/遺伝的介入）が、ERストレス誘導薬ツニカマイシン誘導性の過剰なERストレス応答を抑制した。

内质网（ER）是细胞内蛋白质组装工厂，细胞内钙离子（Ca）控制发挥着重要作用。当细胞受到过度应激时，就会出现内质网应激状态，缺陷蛋白会在内质网内积聚，导致细胞死亡和内质网应激性疾病的发生。我们假设兰尼碱受体 (RyR2)（ER 中的 Ca 释放通道）功能障碍会诱发 ER 应激，慢性肾脏病 (CKD) 也是一种 ER 应激疾病，并且 RyR2 的稳定会抑制 CKD 的进展我把它竖起来了。 Ryanodine受体（RyR2）结构稳定{①药理干预：长期服用RyR稳定药物②遗传干预：RyR2基因修饰（RyR2-V3599K敲入→钙调蛋白（CaM）与RyR2高亲和力结合）}我们验证了对RyR2的抑制使用 5/6 肾切除 (Nx) 小鼠 CKD 模型观察慢性肾脏病 (CKD) 的进展。在野生型 (WT) 小鼠中，5/6 肾切除术后，肾小球滤过率 (GFR) 下降，肾小球变得硬化。然而，即使对 WT 小鼠进行 5/6 肾切除术，并且长期给予 RyR 稳定药物的 RyR2-V3599K 敲入小鼠，肾小球硬化也得到抑制，而 GFR 并未降低。此外，我们验证了培养的足细胞和肾小管细胞中肾细胞的 ER 应激反应。 RyR 和 CaM 的共定位在足细胞和肾小管细胞中得到证实，RyR2 结构稳定（药理学/遗传干预）抑制了 ER 应激诱导药物衣霉素诱导的过度 ER 应激反应。

项目成果

慢性腎臓病の進展抑制剤、及び、蛋白尿及び／又は糸球体硬化の進展抑制剤

慢性肾病进展抑制剂、蛋白尿和/或肾小球硬化症进展抑制剂

• 发表时间: 2022

慢性腎臓病の進展抑制剤、及び、蛋白尿及び／又は糸球体硬化の進展抑制剤

慢性肾病进展抑制剂、蛋白尿和/或肾小球硬化症进展抑制剂

• 发表时间: 2022