がん細胞のインターフェロンシグナルを制御する長鎖noncoding RNAの解析

分析控制癌细胞中干扰素信号的长非编码 RNA

基本信息

批准号：
21K07945
负责人：
新沼猛
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Sapporo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07945/
关键词：
long noncoding RNA IFNシグナリング消化器がん IFNシグナル

项目摘要

消化器癌におけるDLEU1の機能解析を行うために大腸癌細胞株を用いてDLEU1をノックダウンし細胞増殖に与える影響についてcell viability assayを行った。大腸癌についてはいずれの細胞株においてもDLEU1のノックダウンは細胞増殖を抑制した。DLEU1のノックダウンがIFNシグナルに与える影響を調べるためにDLD1、SW480においてIFITM1、IFITM3の発現をRT-qPCRにて解析したところ、口腔扁平上皮癌と異なり、これらのISGｓは発現が不変～上昇傾向であった。さらに他の消化器癌においてDLEU1の機能を解析するために食道癌細胞株を用いてDLEU1をノックダウンし、細胞増殖に与える影響についてcell viability assayを行ったが、食道癌においてはDLEU1のノックダウンにより増殖には一定の傾向が認められなかった。ISGｓに与える影響についてもRT-qPCRにより解析したが、一定の傾向を示さなかった。口腔がん細胞株の遺伝子発現マイクロアレイ解析からDLEU1のノックダウンはIL1の発現を減少させる結果が得られており、qRT-PCRによる解析においても同様の結果が得られた。レンチウイルスを用いたDLEU1の過剰発現系においてはIL1の発現上昇が認められた。口腔がん細胞株KONにIL1Bを添加し、ISGｓの発現をqRT-PCRを用いて解析したところDLEU1により制御されるISGｓであるOAS1,IFITM1の発現上昇が認められた。この事はDLEU1がIL1の発現を介してISGsの発現を制御している可能性を示唆するものと考えられた。

为了分析 DLEU1 在胃肠道癌症中的功能，我们使用结肠癌细胞系敲低 DLEU1，并进行细胞活力测定以检查其对细胞增殖的影响。对于结直肠癌，DLEU1 的敲低可抑制所有细胞系的细胞增殖。为了研究敲低 DLEU1 对 IFN 信号的影响，我们使用 RT-qPCR 分析了 DLD1 和 SW480 中 IFITM1 和 IFITM3 的表达，发现与口腔鳞状细胞癌不同，这些 ISG 的表达保持不变，并呈增加趋势。是的。此外，为了分析DLEU1在其他胃肠道癌症中的功能，我们使用食管癌细胞系敲低DLEU1并进行细胞活力测定以检查对细胞增殖的影响，没有观察到增殖的固定趋势。还通过 RT-qPCR 分析了对 ISG 的影响，但没有观察到一致的趋势。对口腔癌细胞系的基因表达微阵列分析表明，敲低 DLEU1 会降低 IL1 的表达，qRT-PCR 分析也得到了类似的结果。在使用慢病毒的DLEU1过表达系统中，观察到IL1表达增加。当将IL1B添加到口腔癌细胞系KON中并使用qRT-PCR分析ISG的表达时，观察到OAS1和IFITM1（受DLEU1调节的ISG）的表达增加。这表明DLEU1可能通过IL1的表达来控制ISG的表达。