Investigation of leukemogenic mechanism of intractable pediatric leukemia

小儿难治性白血病的致白血病机制探讨

• 批准号: 21K07759
• 负责人: 今村 俊彦
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07759/
• 关键词: ALL; AML; 分子標的薬; レトロウイルス; NUP98::NSD1; SPAG9::JAK2; ETV6::FRK; 白血病; Ph-like ALL; チロシンキナーゼ; 融合遺伝子; Pre-clinical model; PDX

高リスクB-ALL患者より同定したSPAG9::JAK2融合遺伝子をdoxycycline依存性に発現するBa/F3細胞を作成し、STAT1の恒常的リン酸化が、SPAG9::JAK2の細胞増殖活性に重要である事を明らかにし、BCL2およびMCL1阻害剤がJAK2阻害剤と相乗的に作用し、SPAG9::JAK2の細胞増殖活性を抑制する事をin vitroで証明した（Mayumi A, Imamura T. Cancer Gene Ther 2022 doi: 10.1038/s41417-022-00511-z) 。また、高リスクB-ALL患者より同定したETV6::FRK融合遺伝子を、doxycycline依存性に発現するBa/F3細胞を作成し、細胞増殖活性にSTAT1, STAT3, STAT5の恒常的リン酸化が関係する事を明らかにし、dasatinibがETV6::FRKを導入したBa/F3細胞の増殖を抑制する事を、in vitroおよびin vivoの実験系で証明した（Mayumi A, Imamura T, et al. eJHeam 2023 DOI: 10.1002/jha2.701)。さらに、難治性AMLの発症と関連するNUP98::NSD1融合遺伝子の機能解析のため、恒常的にNup98::Nsd1を発現する32D細胞を作成し、作成した細胞の発現アレイ解析や表面マーカー解析を行い、Nup98::Nsd1が32D細胞のCD123(IL3RA)の発現を誘導し、IL-3存在下での細胞増殖活性が上昇する事を明らかにし、標的治療の可能性を示した（Okamoto K, Imamura T, et al. Int J Hematol 2023 in press) 。

我们生成了以强力霉素依赖性方式表达从高危 B-ALL 患者中鉴定出的 SPAG9::JAK2 融合基因的 Ba/F3 细胞，并证明 STAT1 的组成型磷酸化对于 SPAG9::JAK2 的细胞增殖活性很重要我们在体外证明 BCL2 和 MCL1 抑制剂与 JAK2 抑制剂协同作用，抑制 SPAG9::JAK2 的细胞增殖活性（Mayumi A，。 Imamura T.癌症基因疗法 2022 doi：10.1038/s41417-022-00511-z）。此外，我们还生成了 Ba/F3 细胞，该细胞以多西环素依赖性方式表达从高危 B-ALL 患者中鉴定出的 ETV6::FRK 融合基因，并证明 STAT1、STAT3 和 STAT5 的组成型磷酸化与细胞相关。我们使用体外和体内实验系统证明达沙替尼可抑制 ETV6::FRK 转染的 Ba/F3 细胞的增殖（Mayumi A、Imamura T 等人）。 eJHeam 2023 DOI：10.1002/jha2.701）。此外，为了分析与难治性AML发病相关的NUP98::NSD1融合基因的功能，我们创建了组成型表达Nup98::Nsd1的32D细胞，并对所创建的细胞进行了表达阵列分析和表面标记分析。 - 分析显示，Nup98::Nsd1 诱导 32D 细胞中 CD123 (IL3RA) 的表达，并在 IL-3 存在的情况下增加细胞增殖活性，表明靶向治疗的可能性 ( Okamoto K、Imamura T 等人，《Int J Hematol》2023 年出版）。

项目成果

Functional assay for NUP98-NSD1 fusion gene.

NUP98-NSD1 融合基因的功能测定。

• 发表时间: 2021
• 作者: Okamoto K; Kubo H; Miyagaki S; Yoshida H; Osone S; Imamura T.
• 通讯作者: Imamura T.

Leukemic cells expressing ETV6-FRK identified in a refractory B-ALL patient are sensitive to dasatinib in vitro.

在难治性 B-ALL 患者中发现的表达 ETV6-FRK 的白血病细胞在体外对达沙替尼敏感。

• 发表时间: 2021
• 作者: Mayumi A; Yoshida H; Mitsuno K; Nishida N; Osone S; Yasuda T; Imamura T.
• 通讯作者: Imamura T.

Functional assay for NUP98-NSD1 fusion gene.

NUP98-NSD1 融合基因的功能测定。

• 发表时间: 2021
• 作者: Okamoto K; Kubo H; Miyagaki S; Yoshida H; Osone S; Imamura T.
• 通讯作者: Imamura T.

The combination of ruxolitinib and Bcl-2/Mcl-1 inhibitors has a synergistic effect on leukemic cells carrying a SPAG9::JAK2 fusion.

鲁索替尼和 Bcl-2/Mcl-1 抑制剂的组合对携带 SPAG9::JAK2 融合的白血病细胞具有协同作用。

• DOI: 10.1038/s41417-022-00511-z
• 发表时间: 2022
• 影响因子: 6.4
• 作者: Mayumi A; Tomii T; Kanayama T; Mikami T; Tanaka K; Ueno H; Yoshida H; Kato I; Kawamura M; Nakahata T; Takita J; Hosoi H; Imamura T
• 通讯作者: Imamura T

Leukemic cells expressing ETV6-FRK identified in a refractory B-ALL patient are sensitive to dasatinib in vitro.

在难治性 B-ALL 患者中发现的表达 ETV6-FRK 的白血病细胞在体外对达沙替尼敏感。

• 发表时间: 2021
• 作者: Mayumi A; Yoshida H; Mitsuno K; Nishida N; Osone S; Yasuda T; Imamura T.
• 通讯作者: Imamura T.