TRIB1 promotes metastasis through transcriptional activation of EMT-related genes

TRIB1通过EMT相关基因的转录激活促进转移

基本信息

批准号：
21K07095
负责人：
横山隆志
金额：
$ 2.66万
依托单位：
University of Yamanashi
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07095/
关键词：
TGF-β Smad3 TRIB1 EMT がん幹細胞 C/EBPα SMAD3 転移 MAPキナーゼ経路

项目摘要

昨年度の研究結果からTRIB1はC/EBPαの分解を介して細胞運動能やがん幹細胞性の促進に関わること考えられたため，これらの機能に関わるC/EBPα標的遺伝子の探索を行った．公的データベースにおいて，C/EBPαをノックダウンしたヒト乳がん細胞株のRNA-Seqデータセット (GSE132649) を用いて解析した結果，C/EBPαのノックダウンによりSOX2やWNT5B，β-Cateninの発現が上昇していた．そこでA549細胞とTRIB1 KO細胞にTGF-β刺激し，qPCRにより発現解析を行ったがTRIB1 KOによるこれらの遺伝子発現への影響は見られなかった．in vivoのがん転移能を調べるため，ルシフェラーゼを発現させたA549細胞とTRIB1 KOおよびTRIB1再導入細胞をそれぞれヌードマウスの尾静脈から移植し，IVISイメージングシステムによる解析を行った．移植4週間後において野生型とTRIB1再導入細胞は肺への定着が見られたが，TRIB1 KO細胞の定着は著しく減少しており，TRIB1が肺がん細胞の定着にも必須であることが示された．ヒト膵がん細胞株Panc-1においてTRIB1 KO細胞を作製したところ，A549細胞と同様にTRIB1 KOにより上皮細胞マーカーのE-cadherinタンパク質が増加した．このことから肺がんだけでなく，膵がんにおいてもTRIB1がEMTの制御に関わる可能性が考えられた．

根据去年的研究结果，TRIB1被认为通过降解C/EBPα参与促进细胞运动和癌症干性，因此我们寻找参与这些功能的C/EBPα靶基因。使用公共数据库中 C/EBPα 敲低的人类乳腺癌细胞系的 RNA-Seq 数据集 (GSE132649) 进行的分析表明，C/EBPα 的敲低增加了 SOX2、WNT5B 和 β-Catenin 的表达。它。因此，我们用TGF-β刺激A549细胞和TRIB1 KO细胞，并通过qPCR分析其表达，但没有观察到TRIB1 KO对这些基因表达的影响。为了研究体内癌症转移潜力，从裸鼠尾静脉移植表达荧光素酶和 TRIB1 KO 和 TRIB1 重新导入细胞的 A549 细胞，并使用 IVIS 成像系统进行分析。移植后4周，观察到野生型和TRIB1重新引入的细胞在肺部定植，但TRIB1 KO细胞的定植显着减少，表明TRIB1对于肺癌细胞Ta的定植也是必需的。当我们在人胰腺癌细胞系 Panc-1 中生成 TRIB1 KO 细胞时，TRIB1 KO 增加了上皮细胞标志物 E-钙粘蛋白，与 A549 细胞类似。这表明TRIB1可能不仅在肺癌中参与EMT的调节，而且在胰腺癌中也可能参与EMT的调节。