SETによるB型肝炎ウイルス再活性化機構の解析

SET分析乙型肝炎病毒再激活机制

基本信息

批准号：
21K07051
负责人：
伊藤昌彦
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Hamamatsu University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07051/
关键词：
B型肝炎ウイルス潜伏感染再活性化 HBVcccDNA SET HBV再活性化 HBV cccDNA

项目摘要

慢性B型肝炎感染において、HBVウイルスゲノムは安定的なエピソーマルDNA(cccDNA)として肝細胞の核内に潜伏している。この潜伏維持状態は終生つづき、免疫抑制剤・抗がん剤などをきっかけとして、オカルトHBV感染やde novo急性B型肝炎などの再活性化を引き起こす。感染直後はcccDNAやpgRNAなどの発現レベルは高いが、時間経過に伴いその発現レベルは次第に低下し、潜伏感染状態へと移行する。このような潜伏感染状態の維持や再活性化に関するメカニズムについて、現在までまったく分かっていない。これまでに、cccDNAと宿主タンパク質をクロスリンク、ショ糖密度勾配により分画することで、cccDNA 結合タンパク質としてSETを同定した。SETのノックダウン、ノックアウト細胞ではpgRNAレベルやcccDNA複製を亢進することから、SETがHBV複製を抑制していることを明らかにした。また抗腫瘍薬ダサチニブ、ボスチニブ、メトトレキサートおよび副腎皮質ステロイド薬デキサメタゾンなどの添加培養によって、SET遺伝子のプロモーター活性およびmRNAの発現が低下することを明らかにした。本年度は、IP-MSにより同定したH2AXがSETと相互作用すること、またその相互作用はHBV感染により減弱することを近位依存性ビオチン化酵素AirIDを用いたアッセイにより明らかにした。本研究による成果は、cccDNAの形成・維持、活性化の分子機構を解明するだけでなく、ウイルス再活性化という医療的にも重要な問題を克服するための治療への進展が期待できる。

在慢性乙型肝炎感染中，HBV 病毒基因组以稳定的游离 DNA (cccDNA) 形式潜伏在肝细胞核中。这种潜伏状态会持续一生，免疫抑制药物和抗癌药物会导致隐匿性乙型肝炎病毒感染和新发急性乙型肝炎的重新激活。感染后，cccDNA、pgRNA等表达量较高，但随着时间的推移，表达量逐渐下降，出现潜伏感染状态。迄今为止，这种潜伏感染状态的维持和重新激活所涉及的机制尚不清楚。到目前为止，我们通过交联 cccDNA 和宿主蛋白并使用蔗糖密度梯度对其进行分级，将 SET 鉴定为 cccDNA 结合蛋白。在SET敲低和敲除细胞中，pgRNA水平和cccDNA复制增强，表明SET抑制HBV复制。我们还发现，培养物中添加抗肿瘤药物达沙替尼、博舒替尼、甲氨蝶呤和皮质类固醇地塞米松可降低 SET 基因的启动子活性和 mRNA 表达。今年，我们通过使用近端生物素化酶 AirID 进行检测，证明了通过 IP-MS 鉴定的 H2AX 与 SET 相互作用，并且这种相互作用会因 HBV 感染而减弱。这项研究的结果不仅阐明了 cccDNA 形成、维持和激活的分子机制，而且有望带来克服病毒重新激活这一医学上重要问题的治疗方法。

项目成果

期刊论文数量（18）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

SET suppresses HBV cccDNA formation mediated by histone H2AX

SET 抑制组蛋白 H2AX 介导的 HBV cccDNA 形成

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Masahiko Ito; Tetsuro Suzuki
通讯作者：
Tetsuro Suzuki

ヒストンシャペロンSETを介したB型肝炎ウイルスゲノムcccDNA調節機構

组蛋白伴侣SET介导的乙型肝炎病毒基因组cccDNA调控机制

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
伊藤昌彦; 鈴木哲朗
通讯作者：
鈴木哲朗

MafF is an antiviral host factor that suppresses transcription from Hepatitis B Virus core promoter

MafF 是一种抗病毒宿主因子，可抑制乙型肝炎病毒核心启动子的转录

DOI：
10.1128/jvi.00767-21
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
5.4
作者：
Ibrahim Marwa K.;Abdelhafez Tawfeek H.;Takeuchi Junko S.;Wakae Kosho;Sugiyama Masaya;Tsuge Masataka;Ito Masahiko;Watashi Koichi;El Kassas Mohamed;Kato Takanobu;Murayama Asako;Suzuki Tetsuro;Chayama Kazuaki;Shimotohno Kunitada;Muramatsu Masamichi;Aly Husse
通讯作者：
Aly Husse

Regulation mechanism of HBV cccDNA formation via histone chaperone SET/Template-activating factor

组蛋白伴侣SET/模板激活因子调控HBV cccDNA形成的机制