小腸に発現する機能未知OATPトランスポーターの薬物吸収における役割の解明

阐明小肠中表达的功能未知的 OATP 转运蛋白在药物吸收中的作用

基本信息

批准号：
21K06692
负责人：
森本かおり
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Tohoku Medical and Pharmaceutical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06692/
关键词：
トランスポーター OATP 消化管吸収

项目摘要

Organic Anion Transporting Polypeptide(OATP)は、消化管において両親媒性物質の吸収に重要な役割を果たしている。OATPファミリーには12種の分子種が存在しており、小腸にはOATP2A1, 2B1, 3A1, 4A1等の遺伝子発現が確認されているが、OATP2B1以外のOATPsの局在（刷子縁膜か側底膜か）、基質薬物、阻害剤などについて殆ど分かっていない。小腸における薬物吸収にはOATP2B1が主要な役割を果たすと考えられてきた。しかし最近、OATP2B1はヒト小腸側底膜側に発現する有機アニオン排出輸送体であるという報告がなされ、その役割について議論の的となっている。我々はDPPIV阻害剤であるアログリプチンが、OATPと機能の類似したOATP2B1以外の輸送体でCaco-2細胞に取り込まれることを報告した。本研究は、アログリプチンの輸送を担う輸送体の同定を行うことにより、機能未知のOATPsの基質認識特性の一端を明らかにすることを目的としている。これまでにOATP2B1 knockdown Caco-2細胞、並びにOATP2B1高発現Caco-2細胞（OATP2B1の吸収／排出の方向性や基質認識特性の確認の目的）の作成に挑戦したが、研究材料として利用可能な細胞を得ることは出来なかった。そこでヒト小腸で高発現しているOATP4A1に焦点を絞り、発現系の作成、免疫組織染色によるヒト小腸における局在の確認を行った。既存およびカスタム合成した抗体を用いた免疫組織化学染色の結果、OATP4A1は、ヒト小腸では上皮細胞全体に分散した状態で局在していることが確認され、基質の細胞膜透過の律速過程の役割をしていない可能性が推察された。Flag標識したOATP4A1発現系でも同様の結果なのかを確認する予定である。機能解析については現在進行中である。

有机阴离子转运多肽（OATP）在两亲物在胃肠道的吸收中发挥重要作用。 OATP家族有12个分子种类，OATP2A1、2B1、3A1、4A1等基因已在小肠中得到证实表达，但OATP2B1以外的OATP（刷状缘膜或基底外侧）的定位知之甚少。关于膜、底物药物和抑制剂。 OATP2B1被认为在小肠药物吸收中发挥重要作用。然而，最近有报道称OATP2B1是一种表达于人小肠基底外侧膜的有机阴离子外排转运蛋白，其作用一直存在争议。我们报道了阿格列汀（一种 DPPIV 抑制剂）被 OATP2B1 以外的转运蛋白摄取到 Caco-2 细胞中，OATP2B1 的功能与 OATP 相似。本研究的目的是通过鉴定负责转运阿格列汀的转运蛋白，阐明功能未知的 OATP 的部分底物识别特性。到目前为止，我们已经尝试创建OATP2B1敲低的Caco-2细胞和高表达OATP2B1的Caco-2细胞（以确认OATP2B1吸收/排泄和底物识别特性的方向性），但这些细胞可以用作研究材料I。无法得到它。因此，我们关注在人小肠中高表达的OATP4A1，创建了表达系统，并通过免疫组织化学染色证实了其在人小肠中的定位。使用现有和定制合成的抗体进行的免疫组织化学染色证实，OATP4A1 以分散的方式定位于人小肠的上皮细胞中，并推测在底物渗透细胞膜的限速过程中发挥作用。它可能还没有完成。我们计划确认使用 Flag 标记的 OATP4A1 表达系统是否可以获得类似的结果。目前正在进行功能分析。

项目成果

期刊论文数量（1）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Intestinal Absorption of Alogliptin Is Mediated by a Fruit-Juice-Sensitive Transporter

阿格列汀的肠道吸收是由果汁敏感转运蛋白介导的

DOI：
10.1248/bpb.b20-00947
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
2
作者：
Morimoto Kaori;Sasaki Momona;Oikawa Erika;Abe Maho;Kikuchi Tatsuro;Ishii Makoto;Ogihara Takuo;Tomita Mikio
通讯作者：
Tomita Mikio

Intestinal Absorption of Alogliptin Is Mediated by a Fruit-Juice-Sensitive Transporter

阿格列汀的肠道吸收是由果汁敏感转运蛋白介导的

DOI：
10.1248/bpb.b20-00947
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
2
作者：
Morimoto Kaori;Sasaki Momona;Oikawa Erika;Abe Maho;Kikuchi Tatsuro;Ishii Makoto;Ogihara Takuo;Tomita Mikio
通讯作者：
Tomita Mikio