脳内自己回復機構に基づく新規ストレス性不安障害治療法の開発

基于大脑自愈机制开发一种新型压力诱发焦虑症治疗方法

基本信息

批准号：
21K06380
负责人：
田村英紀
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Hoshi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年度、我々は中脳水道灰白質（PAG）ソマトスタチン発現細胞が青斑核（LC）ノルアドレナリン作動性ニューロンにシナプス結合していることを明らかとした。しかしながら、この神経回路の機能的役割は明らかではない。そこで、本年度は、まず PAG-LC ソマトスタチン発現細胞が急性ストレス負荷時に活性化するか否かを検討した。逆行性神経トレーサーにより PAG-LC 神経を標識すると共に蛍光 in situ hybridization および蛍光免疫染色によって、PAG-LC ソマトスタチン発現細胞における c-Fos タンパク質（神経活動マーカー）の発現の有無を調べた。その結果、成熟マウスに、急性拘束ストレスを負荷した結果、多くの PAG-LC ソマトスタチン発現細胞で c-Fos 陽性反応が認められた。次に、ストレス負荷によって活性化した PAG-LC ソマトスタチン発現細胞から放出されるソマトスタチンおよび GABA のはたらきを、Cre/loxP システムを搭載した逆行性アデノ随伴ウイルス（rgAAV）shRNA ノックダウンベクターによって検討した。その結果、PAG-LC ソマトスタチン発現細胞のソマトスタチン遺伝子を選択的にノックダウンしたマウスでは、急性ストレス負荷後の不安様行動が増大した。また小胞 GABA トランスポーター（Slc32a1）遺伝子をノックダウンすることで、GABA の放出を抑制したマウスにおいても、ストレス性不安様行動が増大した。以上のことから、PAG-LC ソマトスタチン発現細胞から遊離する神経伝達物質は、ストレス性不安様行動を負に制御していることが明らかとなった。

去年，我们发现导水管周围灰质（PAG）中表达生长抑素的细胞与蓝斑（LC）中的去甲肾上腺素能神经元有突触连接。然而，这种神经回路的功能作用尚不清楚。因此，今年，我们首先研究了 PAG-LC 生长抑素表达细胞在急性应激负荷期间是否被激活。我们用逆行神经示踪剂标记 PAG-LC 神经元，并通过荧光原位杂交和免疫染色检查 PAG-LC 生长抑素表达细胞中 c-Fos 蛋白（神经活性标记物）表达的存在或不存在。结果，当成年小鼠受到急性束缚应激时，在许多表达PAG-LC生长抑素的细胞中观察到c-Fos阳性反应。接下来，我们使用配备 Cre/loxP 系统的逆行腺相关病毒 (rgAAV) shRNA 敲除载体研究了通过应激负荷激活的 PAG-LC 生长抑素表达细胞释放的生长抑素和 GABA 的功能。结果，当 PAG-LC 生长抑素表达细胞中的生长抑素基因被选择性敲除时，小鼠在受到急性应激后，焦虑样行为会增加。此外，通过敲除囊泡 GABA 转运蛋白 (Slc32a1) 基因来抑制 GABA 释放的小鼠也表现出增加的压力诱导的焦虑样行为。由上可知，表达 PAG-LC 生长抑素的细胞释放的神经递质对应激诱导的焦虑样行为具有负调节作用。