Exploration of clinical phenotype and pathogenic mechanisms of GNAS related disease

GNAS相关疾病的临床表型及发病机制探讨

基本信息

批准号：
20K08178
负责人：
佐野伸一朗
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Shizuoka Prefectural Hospital Organization
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本邦PHPの出生時からのデータはまだ予定症例数に及ばないが、入手済データより解析を開始している。現在GNAS遺伝子異常に伴うPHP28名（欠失含む）、メチル化異常に伴うPHP85名（GNAS broad methylation defects 45名, STX16微小欠失27名)のデータ整理が終了している。PHP-Iaと臨床診断された1例に、スプライスバリアントによると考えられる症例を同定した。患者セルラインを用いて分子遺伝学解析により、異常なスプライスバリアントが生じることを証明できた。現在論文作成中である。母とその子2名が臨床的にPHPと診断されている家族例に対して分子遺伝学的解析を進めた。兄と妹において、GNAS遺伝子変異は認めず、GNAS A/B-DMR の軽度低メチル化、XLAS-DMR, AS-DMR, NESP55-DMRの正常メチル化を認めた。aCGH解析で染色体構造異常を認めず、全ゲノムシーケンスによりGNAS A/B-DMRの上流 (chr20: 57438739-57438751, hg19) にSVA型レトロトランスポゾンの挿入を同定した。患者皮膚繊維芽細胞を用いたRNAseqおよびqPCRでは、GNAS A/B遺伝子の発現増加を認めた。本症例では、NESP55とGNAS A/B-DMR間のレトロトランスポゾン挿入が、1) NESP55等とGNAS A/B-DMRとの相互作用を阻害したと想定した。患者由来iPSにてNESP55の発現低下を確認した。これによりGNAS A/B遺伝子発現が増強した考えられた。以上の結果は下記論文に発表した。J Bone Miner Res. 2022 Oct;37(10):1850-1859. doi: 10.1002/jbmr.4652. Epub 2022 Aug 17.

日本PHP诞生的数据仍然小于发病案例的数量，但已从获得的数据开始分析。目前，具有GNA基因异常的PHP（包括缺失），85 php的数据排列（GNA宽阔的甲基化缺陷45人，27个小损失）伴随着甲基化异常。在PHP-IA和一个临床诊断的情况下发现了被认为是由于云杉变体引起的病例。使用患者细胞系的分子遗传分析证明，将会发生异常的剪接变异。我们目前正在创建论文。分子遗传分析已促进了她的母亲和两个孩子被临床诊断为PHP的家庭病例。在他的兄弟姐妹中，没有认识到GNA基因突变，而GNAS A/B-DMR则是轻度低元素，XLAS-DMR，AS-DMR，NESP55-DMR归一化。 ACGH分析未识别染色体结构异常，并且在GNAS A/B-DMR的上游中鉴定出SVA型复古转运型的插入（CHR20：57438739-57438751，HG19，HG19）通过所有基因组序列。使用患者皮肤纤维芽的RNASEQ和QPCR允许GNA A/B基因的表达增加。在这种情况下，假定Nesp55和GNAS A/B-DMR之间的插入抑制了Nesp55和GNAS A/B-DMR之间的相互作用。在患者衍生的IPS中证实了Nesp55表达的降低。结果，GNA A/B基因表达得到了增强。上述结果在以下论文中发表。 J型矿工Res。