Investigation on viral inhibitory effects of food ingredients.

食品成分的病毒抑制作用研究。

基本信息

批准号：
21K05433
负责人：
矢野明
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Iwate Biotechnology Research Center
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、新型コロナウイウルスSARS-CoV-2をモデルとしてウイルス感染症の抑制機能を有する食品素材の探索を行い、有効成分を特定することで食品等の利活用による健康維持・増進技術の解明につながる基礎的知見を得ることを目的としている。初年度から次年度にかけ、スクリーニング系の確立と、有望素材の選抜を行った。すなわち 1. SARS-CoV-2 Spikeタンパク質とその受容体ACE2を用いた複数種のELISA系によるウイルス結合阻害活性評価系、2. ウイルスの細胞融合を促進するプロテアーゼTMPRSS2阻害活性評価系、3. 感染によるサイトカインストームを模倣したHeLa細胞によるIL-6過剰発現阻害活性評価系により、北東北の農林水産物（約500種）から作製した抽出物ライブラリーから有望素材の選抜を行った。実際には、近縁種等を考慮して約110種の代表的素材の抽出物を評価し、1. ウイルス結合阻害素材として、緑茶、コシャク、ヤマミズ、甘茶、セリ、アカモク等、3. IL-6発現抑制素材としてカリン、ヤーコン、ケンポナシ、食用菊、クラブアップル、ゴールデンベリーなどを選抜した。2. TMPRSS2は市販酵素の安定性に問題があり、酵母による組換えTMPRSS2の作製を実施した。有効成分特定について、1. ウイルス結合阻害成分を甘茶から単離同定を行い、既報の抗ウイルス成分であるNaringeninおよび、新たな有効成分として、Dihydroisocoumarins（phyllodulcin and hydrangenol）の同定に成功した。3. IL-6発現阻害成分についてゴールデンベリーの葉に含有されるwithanolide類を特定し、4beta-hydrxywithanolide Eおよびwithanolide Eが主たる阻害成分の一つであることが明らかとなった。

在这项研究中，我们将以新型冠状病毒SARS-CoV-2为模型，寻找具有抑制病毒感染功能的食品材料，并通过鉴定其活性成分，开发通过使用这些食品来维持和促进健康的技术。目的是获得有助于阐明的基础知识。从第一年到第二年，我们建立了筛选体系，筛选出有潜力的材料。换句话说，1.使用SARS-CoV-2 Spike蛋白及其受体ACE2的多个ELISA系统的病毒结合抑制活性评估系统，2.促进病毒细胞融合的蛋白酶TMPRSS2抑制活性评估系统，3.感染。使用基于 HeLa 细胞的评估系统从东北北部的农业、林业和渔业产品（约 500 种）提取物中提取出有前景的材料，以抑制 IL-6 过度表达，模拟病毒引起的细胞因子风暴。事实上，我们评估了约110种代表性材料的提取物，考虑到密切相关的物种，并选择了1.绿茶、Koshak、山水、甜茶、日本香菜、赤木等作为病毒结合抑制材料，3. IL 我们选择柑橘、雪莲果、日本梨、食用菊花、海棠果和金浆果作为抑制-6表达的材料。 2. TMPRSS2存在市售酶的稳定性问题，因此我们利用酵母构建了重组TMPRSS2。关于活性成分的鉴定，1.我们从甜茶中分离鉴定了病毒结合抑制成分，并成功鉴定了先前报道的抗病毒成分柚皮素和二氢异香豆素（叶黄素和绣球酚）作为新的活性成分。 3.金莓叶中含有的醉茄内酯被鉴定为抑制IL-6表达的成分，其中4β-羟基醉茄内酯E和醉茄内酯E是主要抑制剂之一。