抗体軽鎖配列の組み合わせと抗原への交差反応性の関係

抗体轻链序列组合与抗原交叉反应的关系

• 批准号: 21K05300
• 负责人: 大島 信子
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Fujita Health University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K05300/
• 关键词: ファージディスプレイ; 交差反応性; 抗体軽鎖; 交差反応

ファージディスプレイ技術により作製したヒトファージ抗体ライブラリーでは、1種類の重鎖配列に対し様々な種類の軽鎖配列との組み合わせを持たせることが可能である。当該研究では、ファージディスプレイ技術を基に作製したファージ抗体ライブラリーから取得した抗インフルエンザウイルス抗体群から、1種類の抗体重鎖配列に対し複数の軽鎖配列の組み合わせを持つ抗体群の抽出を行い、軽鎖配列の違いによりインフルエンザウイルス株への交差反応性にどのような影響を及ぼすかを検討することにより、抗原認識における軽鎖配列の役割を明らかにすることが目的である。昨年度に引き続き当該年度も、解析対象となる5000個以上の抗インフルエンザウイルス抗体クローンの軽鎖配列の解析を行った。今年度で、解析が必要であると判断した抗体クローンすべての軽鎖の塩基配列解析を終了した。その塩基配列をもとに抗体の分類を行っており、さらにそれらの由来となるGermline GeneをNCBIのIgBlastで検索し、順次決定した。さらにそのGermlineとのアミノ酸配列との比較もIgBlastで行い、変異の導入率を算出した。また、塩基配列解析および分類の終了したクローンの中から、中和抗体のターゲットであり、ウイルス膜タンパクであるヘマグルチニン (HA)を認識する可能性のある抗体候補を、ウイルス核タンパクに対し結合活性のある抗体を除去することで選抜した。そのクローンに対し、複数のインフルエンザウイルス株に対し交差反応性を示す抗体クローンの有無を検討している。当該年度においてはファージ抗体ライブラリーからスクリーニングされた抗体群、特にインフルエンザウイルス中和抗体群の重鎖－軽鎖配列の組み合わせの詳細が判明しつつあるとともに、交差反応性解析へ適用できる抗体クローンの選出も進みつつある。

在利用噬菌体展示技术创建的人噬菌体抗体库中，可以将一种类型的重链序列与多种类型的轻链序列组合。在这项研究中，我们从基于噬菌体展示技术创建的噬菌体抗体库中获得的一组抗流感病毒抗体中，提取了一组具有多种轻链序列与一种抗体重链序列组合的抗体。本研究的目的是通过检查轻链序列的差异如何影响与流感病毒株的交叉反应性来阐明轻链序列在抗原识别中的作用。继去年之后，今年我们分析了超过5000个抗流感病毒抗体克隆的轻链序列。本财年，我们完成了所有被认为需要分析的抗体克隆的轻链核苷酸序列分析。抗体根据其核苷酸序列进行分类，并使用 NCBI 的 IgBlast 搜索其来源的种系基因并按序列确定。此外，使用IgBlast将氨基酸序列与Germline的氨基酸序列进行比较，并计算突变引入率。此外，从经过核苷酸序列分析和分类的克隆中，我们选择了具有识别中和抗体目标病毒膜蛋白血凝素（HA）潜力，并具有与病毒结合活性的候选抗体。通过去除某些抗体进行选择。我们目前正在研究是否存在对多种流感病毒株表现出交叉反应的抗体克隆。本财年，从噬菌体抗体库中筛选出的抗体组，特别是流感病毒中和抗体的重链-轻链序列组合的细节变得更加清晰，并且正在鉴定可应用于交叉反应分析的抗体克隆。选拔过程也在进行中。