Non-invasive metabolomics analysis study for children with disabilities

残疾儿童无创代谢组学分析研究

基本信息

批准号：
21K11219
负责人：
中村勇
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Ibaraki Prefectural University of Health Science
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

前年度から継続してマウスの検体については、グリア細胞、脳の前頭前野・海馬の組織、血漿、尿などを分析測定対象として前処理を試行錯誤し、それぞれの処理方法によって多数の代謝化合物を確認することはできている。前処理方法については、それぞれの長所・短所があり、測定値も処理方法によって解釈を考慮しなければならなかった。またタンパク質の除去についても課題は残しているが、ある程度の測定方法は用意できるようになってきた。ヒト混合唾液の分析でも、代謝物質は200程度が測定できている。しかし成分分析を行う容量の決定について補正する物質、また全身の代謝状態をどの程度反映しているのか?については検討の余地が残っている。ヒトのスポット尿の分析では、GC-MSによるSCANモード,MRMモード双方の健常者データを蓄積していっている。検体の前処理方法で検出されるデータの幅が異なるため、多くの物質を検出するために複数の誘導体化方法を試した。しかし試薬を変更したり誘導体化の種類を増やすと、基礎データとしてはとり直しになってしまうことがあった。他、MRMモードではプロダクトイオンの設定が不十分なためか、適切に手動波形処理しなければ検出し損なうこともあった。このように超微量成分を定性・定量するためには試行錯誤は避けられず、慎重に実験を行っているため時間を要す面もあるが、100検体以上のデータは蓄積できている。よって次年度に向け、ケモメトリクスの検討が少しずつできるようになってきている。

延续去年，我们对小鼠样本进行了试错预处理，针对胶质细胞、大脑前额皮质/海马组织、血浆、尿液等，使用每种处理方法，我们都测试了我已经能够证实这一点。每种预处理方法都有其优点和缺点，必须根据处理方法考虑测量值的解释。尽管蛋白质去除仍然存在问题，但现在已经有了一些测量方法。在人类混合唾液的分析中测量了大约 200 种代谢物。但对于成分分析时应使用哪些物质来修正体积测定，以及在多大程度上反映全身的代谢状态，还有考虑的空间？在对人体点尿的分析中，我们使用 GC-MS 使用 SCAN 模式和 MRM 模式积累健康受试者的数据。由于检测到的数据范围因样品前处理方法而异，因此尝试了多种衍生化方法来检测许多物质。但如果改变试剂或增加衍生化种类，有时就需要修改基础数据。此外，在 MRM 模式下，如果没有适当的手动波形处理，有时无法检测到产物离子，这可能是由于产物离子设置不足所致。为了对超痕量成分进行定性和定量定量，反复试验是不可避免的，并且实验需要仔细进行，这可能需要时间，但我们已经能够积累 100 多个样品的数据。因此，我们逐渐开始考虑明年的化学计量学。