法科学的体液資料を網羅する汎用性の高い体液の識別検査法の確立

建立涵盖法医体液材料的通用性强的体液鉴定测试方法

• 批准号: 21K10538
• 负责人: 阿久津 智子
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: National Research Institute of Police Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K10538/
• 关键词: mRNA; マルチプレックスRT-PCR法; TaqMan RT-qPCR法; 網羅的; 月経血; 鼻汁

月経血マルチプレックスRT-PCR法について、一部の月経血マーカーが他の体液からも検出されたことを受けて、陽性判定基準を策定するため、月経血マーカーのピーク高をリファレンスマーカーのピーク高で除した補正値に対してカットオフ値を設定した。それらのカットオフ値を適用したところ、いずれのマーカーも月経血に対する特異性が向上する一方、一部のマーカーでは月経血からの検出性が低下した。また、精液において月経血との補正値の分離が不十分な試料があり、これらに対しては定量的な評価が必要と考えられた。そこで、検出法をTaqMan RT-qPCR法に変更し、月経血マーカーのCq値からリファレンスマーカーのCq値を減じた⊿Cq値に対して、陽性判定のためのカットオフ値を設定した。それにより、マルチプレックス法と同等の特異性で検出性を向上させることができ、精液との分離も改善された。TaqMan RT-qPCR法により、血液を混合させた膣液斑と月経血痕とを識別可能であり、本検査法で膣内容物に混入する血液の由来を推定することで、性犯罪の立証に貢献しうると考えられた。鼻汁については、引き続きデータベースや文献検索によるマーカー候補の選定を行ったが、いずれも、すでに16-plex RT-PCR系に組み込んでいるBPIFA1やSTATHと比較して、増幅が非常に弱いか認められなかった。したがって、鼻汁識別へのmRNAマーカーの活用は難しいと考えられた。

对于经血多重RT-PCR方法，针对某些经血标志物在其他体液中也检测到的情况，为了制定阳性判断标准，将经血标志物的峰高与经血标志物的峰高进行比较为校正值除以设置截止值。当应用这些截止值时，所有标记物对经血的特异性均得到提高，但来自经血的某些标记物的可检测性下降。此外，还有一些精液样本的校正值与经血分离不充分，认为有必要对这些样本进行定量评估。因此，检测方法改为TaqMan RT-qPCR方法，并为⊿Cq值设定阳性判定的截止值，该值是由经血的Cq值减去参考标记物的Cq值得到的。标记。结果，可以提高与多重方法相同的特异性的检测能力，并且也提高了与精液的分离。 TaqMan RT-qPCR方法可以区分混有血液的阴道液斑和月经血迹，这种测试方法可以通过估计阴道内容物中混有的血液的来源来帮助证明性犯罪。关于鼻分泌物，我们继续通过搜索数据库和文献来选择候选标志物，但与已经纳入16重RT-PCR系统的BPIFA1和STAH相比，所有这些标志物的扩增都很弱或没有观察到。不是。因此，利用 mRNA 标记来识别鼻分泌物被认为是困难的。

项目成果

性犯罪の立証に向けた直腸粘膜マーカーの探索と評価

直肠粘膜标志物的搜索和评估以证明性犯罪

• 发表时间: 2022
• 作者: 阿久津智子;斉藤久子;渡邊賢;豊間根耕地;山岸孝幸;岩瀬博太郎
• 通讯作者: 岩瀬博太郎

Evaluation and simultaneous determination of rectal mucosa markers by multiplex reverse transcription-PCR for biological evidence of sexual assault with anal penetration

通过多重逆转录-PCR 评估和同时测定直肠粘膜标记物，作为肛门渗透性侵犯的生物学证据

• DOI: 10.1016/j.fsigen.2022.102712
• 发表时间: 2022
• 期刊: Forensic Science International: Genetics
• 作者: Tomoko Akutsu;Hisako Saito;Ken Watanabe;Kochi Toyomane;Takayuki Yamagishi;Hirotaro Iwase
• 通讯作者: Hirotaro Iwase

Precise and comprehensive determination of multiple body fluids by applying statistical cutoff values to a multiplex reverse transcription-PCR and capillary electrophoresis procedure for forensic purposes

通过将统计截断值应用于用于法医目的的多重逆转录 PCR 和毛细管电泳程序，精确、全面地测定多种体液

• DOI: 10.1016/j.legalmed.2022.102087
• 发表时间: 2022
• 期刊: Legal Medicine
• 影响因子: 1.5
• 作者: Akutsu Tomoko;Yokota Isao;Watanabe Ken;Toyomane Kochi;Yamagishi Takayuki;Sakurada Koichi
• 通讯作者: Sakurada Koichi

マルチプレックスRT-PCR法による体液識別における標的体液の種類と組み合わせが検査結果に与える影響

多重RT-PCR法体液鉴定中目标体液类型及组合对检测结果的影响

• 发表时间: 2022
• 作者: 阿久津智子;横田勲;渡邊賢;豊間根耕地;山岸孝幸;櫻田宏一
• 通讯作者: 櫻田宏一