網膜色素上皮細胞における新規細胞死シグナルの検証

视网膜色素上皮细胞中新型细胞死亡信号的验证

• 批准号: 21K09758
• 负责人: 上田 高志
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09758/
• 关键词: 網膜色素上皮; GPx4; ノックアウト; 遺伝子導入; フェロトーシス; 網膜色素上皮細胞; 細胞死; ノックアウトマウス; 加齢黄斑変性

前年度に網膜色素上皮（RPE）特異的にCreを発現するアデノ随伴ウィルス（AAV）ベクターを作製して実際にマウスに投与し機能することを確認していた。今年度はGPx4のfloxマウスについてRPE特異的なCre発現AAVベクターを網膜下投与した。対照群にはGPx4のfloxマウスにvehicleのリン酸緩衝生理食塩水（PBS）を網膜下投与した。結果、急速なRPE変性を認めた。変性の特徴として、酸化脂質の蓄積、補体活性化を伴っていた。また、ビタミンEの投与によって変性のフェノタイプはレスキューされた。従来より酸化脂質の生成が加齢黄斑変性の病態に深く関与していると考えられてきたが、それを直接証明するエビデンスに乏しかった。本研究ではGPx4ノックアウトによってRPEで酸化脂質を生成したところ萎縮型加齢黄斑変性に類似点のある変性が得られており、酸化脂質の病態への関与が直接証明されたこととして重要性が高いと考えられる。

在上一年，制备了与视网膜色素上皮（RPE）中专门表达CRE的腺相关病毒（AAV）载体，并在实践中对小鼠进行给药，以确认其起作用。今年，用表达RPE的AAV载体向下递给gpx4 flox小鼠。在对照组中，用磷酸盐缓冲盐水（PBS）向潜在的续海续球施用GPX4 Flox小鼠。结果，观察到快速的RPE变性。变性的特征伴随着氧化脂质的积累和补体激活。此外，通过维生素E的给药来挽救变性表型。人们认为，氧化脂质的产生与年龄相关的黄斑变性的病理非常重要，但是几乎没有任何直接证明这一点的证据。在这项研究中，当使用GPX4敲除RPE产生氧化的脂质时，获得了与萎缩年龄相关的黄斑变性类似的变性，并且它被认为非常重要，因为它参与了氧化脂质的病理状态。

项目成果

Macular and peripapillary retinal nerve fiber layer thinning in eyes with prediabetes in the elderly population: OTASSHA study

• DOI: 10.1007/s00417-022-05925-x
• 发表时间: 2022-12-01
• 期刊: GRAEFES ARCHIVE FOR CLINICAL AND EXPERIMENTAL OPHTHALMOLOGY
• 影响因子: 2.7
• 作者: Toyama，Taku;Kawai，Hisashi;Ueta，Takashi
• 通讯作者: Ueta，Takashi

網膜色素上皮特異的GPx4ノックアウトマウスの検証

视网膜色素上皮特异性 GPx4 敲除小鼠的验证

• 发表时间: 2023
• 作者: 東 邦洋;上田 高志;白矢 智靖;相原 一
• 通讯作者: 相原 一