Development of neuroprotective therapy targeting retinal glial cells

针对视网膜神经胶质细胞的神经保护疗法的开发

基本信息

批准号：
21K09736
负责人：
檜森紀子
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

8週齢の野生型マウスとNrf2ノックアウト（KO）マウスにロテノン（30mg/kg）または0.5 % carboxymethyl cellulose（コントロール）を30日間経口投与し、酸化ストレスマーカー8-OHdGを使用した免疫染色、網膜神経節細胞（RGC）数計測、網膜RT-PCR、グリア細胞の免疫染色を施行した。生後5-8日の野生型及びNrf2 KOマウスからミュラー細胞を調製しロテノン（3-100 μM）投与下の細胞生存率と活性酸素分子種（ROS）量をalamarBlue assay、CellROX Green染色で調べた。ロテノン30 µM下の神経栄養因子の遺伝子発現を時間毎にリアルタイムPCRで検討した。野生型・Nrf2KOマウスともロテノン投与群ではコントロールと比べ8-OHdG陽性細胞数の増加を認めたが（P=0.02, P=0.02）、RGC数では有意差を認めなかった。RT-PCRではロテノンを投与したNrf2 KOマウス群において、野生型と比較してGFAP、vimentinの発現上昇を認め（P=0.02, P < 0.01）、免疫染色ではGFAPのシグナル増強を認めた。野生型と比較しNrf2 KOマウスのミュラー細胞の生存率はロテノン存在下で有意に低く（P < 0.05）、ロテノン30、100 µM下のミュラー細胞内ROSは有意に増加した（P < 0.05)。また、ロテノン投与6、24時間後のNrf2 KOマウスのミュラー細胞において神経栄養因子（BDNF、bFGF）の有意な発現上昇を認めた (P < 0.05)。以上よりロテノン存在下、Nrf2 KOマウスのミュラー細胞では神経栄養因子の発現が増強され、神経保護に寄与することが示唆された。

口服的藤酮（30 mg/kg）或0.5％的羧甲基纤维素（对照）口服8周大的野生型小鼠和NRF2敲除（KO）小鼠30天，并使用氧化应激标记8-OHDG，Retinal神经节细胞（RGC）进行免疫染色，然后进行氧化应激标记物（RGC）ccr nimnical ccr and int-Pcr and ccr and ccr and int-Pcr and ccr and ccr and rt-pcr and rt-pcr and-rt-pcr-rt-prt and rt-rt-rt-prt and rt-pcr rt-rt-pcr rt-rt-pcr and rt-pccr。出生后5-8天，由野生型和NRF2 KO小鼠制备穆勒细胞，并通过Alamarblue Assay和Cellrox绿色染色检查细胞活力和烤烤烤（3-100μM）下的活性氧（ROS）的量。在烤面包酮30 µM下，神经营养因子的基因表达通过每小时的实时PCR检查。在野生型和NRF2KO小鼠中，与对照组相比，8-OHDG阳性细胞的数量增加（p = 0.02，p = 0.02），但RGC的数量没有明显差异。与野生型相比，用烤面包酮的NRF2 KO小鼠组中RT-PCR的GFAP和波形蛋白表达增加（P = 0.02，P <0.01），而免疫染色显示GFAP的信号增强。与野生型相比，在烤面包酮的存在下，NRF2 KO小鼠中Muller细胞的存活率显着降低（P <0.05），而在Rotenone 30和100 µm下的细胞内ROS显着增加（P <0.05）。此外，在给药紫红酮后6和24小时内观察到在NRF2 KO小鼠的Muller细胞中观察到神经营养因子（BDNF，BFGF）的显着增加（p <0.05）。这些结果表明，在葡萄干酮存在下，NRF2 KO小鼠的Muller细胞中神经营养因子的表达增强，有助于神经保护。

项目成果

期刊论文数量（11）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

The Effect of Dietary Antioxidant Supplementation in Patients with Glaucoma.

DOI：
10.2147/opth.s314288
发表时间：
2021
期刊：
Clinical ophthalmology (Auckland, N.Z.)
影响因子：
0
作者：
Himori N;Inoue Yanagimachi M;Omodaka K;Shiga Y;Tsuda S;Kunikata H;Nakazawa T
通讯作者：
Nakazawa T

Optic neuritis after ocular trauma in anti-aquaporin-4 antibody-positive neuromyelitis optica spectrum disorder.

DOI：
10.1002/brb3.2083
发表时间：
2021-05
期刊：
Brain and behavior
影响因子：
3.1
作者：
Akaishi T;Himori N;Takeshita T;Fujihara K;Misu T;Takahashi T;Fujimori J;Ishii T;Aoki M;Nakazawa T;Nakashima I
通讯作者：
Nakashima I

Glial cells modulate retinal cell survival in rotenone-induced neural degeneration.

DOI：
10.1038/s41598-021-90604-w
发表时间：
2021-05-27
期刊：
Scientific reports
影响因子：
4.6
作者：
Tawarayama H;Inoue-Yanagimachi M;Himori N;Nakazawa T
通讯作者：
Nakazawa T

CHOP deletion and anti-neuroinflammation treatment with hesperidin synergistically attenuate NMDA retinal injury in mice.

CHOP 缺失和橙皮苷抗神经炎症治疗可协同减轻小鼠 NMDA 视网膜损伤。

DOI：
10.1016/j.exer.2021.108826
发表时间：
2021
期刊：
Exp Eye Res
影响因子：
3.4
作者：
Sato K;Sato T;Ohno-Oishi M;Ozawa M;Maekawa S;Shiga Y;Yabana T;Yasuda M;Himori N;Omodaka K;Fujita K;Nishiguchi KM;Ge S;Nakazawa T.
通讯作者：
Nakazawa T.

今後の高齢者診療におけるAI・科学技術の活用

人工智能和科技在未来老年护理中的运用