網膜色素変性症治療のための高効率なゲノム編集遺伝子治療の開発

开发高效基因组编辑基因疗法治疗色素性视网膜炎

• 批准号: 21K09673
• 负责人: 藤田 幸輔
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09673/
• 关键词: 網膜色素変性; 遺伝子治療; ゲノム編集; アデノ随伴ウイルス

網膜色素変性は、本邦での中途失明原因の第2位の遺伝性神経変性疾患である。本研究の目的は、ゲノム編集を用いて、網膜色素変性症の病因となる遺伝子変異をより効率的に修復できる遺伝子治療の技術を開発することである。申請者らが作製に成功したall-in-oneゲノム編集遺伝子治療アデノ随伴ウイルス（AAV）ベクターを用いて、全盲網膜変性マウスを対象とした遺伝子治療を行い、ゲノムの修復と視力の回復の程度について検証し、より効果的な治療法を決定する。具体的には、①投与することでゲノム編集効率を促進する薬剤の開発、②編集効率を向上させるためにドナー配列を最適化したベクターの開発、③網膜変性マウスモデルを用いた治療効果の評価の3つのステップで実験をすすめる。当該年度は、編集効率を向上させるためにドナー配列を最適化したベクターの開発を行った。マイクロホモロジーアームの長さについて培養細胞を用いて検討し、ゲノム解析とmRNA解析により、最適な長さのマイクロホモロジーアームを決定した。その過程で新しいゲノム編集治療ベクターの開発にも成功した。今後は、マウスモデルでの評価を行い編集成功率の向上に取り組む計画である。本研究により、効率的なゲノム修復ができるようになった場合、治療不可能であった遺伝子変異に対する治療が可能となる。さらに、開発した遺伝子治療法は、網膜色素変性症だけではなく、他の遺伝性網膜疾患や網膜以外の遺伝性疾患の治療にも応用できるものである。

视网膜色素是日本第二大遗传神经退行性疾病，导致中右眼。这项研究的目的是开发一种基因治疗技术，该技术可以通过使用基因组编辑来更有效地修复基因突变，从而导致视网膜色素。使用申请人成功产生的全基因组编辑的基因治疗腺相关病毒（AAV）载体，将用于总盲视网膜退行性小鼠中，将使用基因组修复和视力恢复的程度，并确定更有效的治疗。具体而言，将分三个步骤进行实验：1）施用时促进基因组编辑效率的药物的发展，2）使用视网膜退化小鼠模型评估具有优化供体序列以提高编辑效率的载体的开发，以提高编辑效率。在今年，我们开发了具有优化供体序列的向量，以提高编辑效率。使用培养细胞检查了微学臂的长度，并通过基因组和mRNA分析确定微型学臂的最佳长度。在此过程中，我们还成功地开发了一种新的基因组编辑疗法载体。将来，我们计划使用鼠标模型评估并努力提高编辑成功率。这项研究允许有效的基因组修复，并且可以治疗未处理的遗传突变。此外，开发的基因疗法方法不仅可以应用于视网膜色素，还可以治疗其他遗传性视网膜疾病和非视网膜遗传性疾病。

项目成果

単一のAAVベクターによるゲノム編集を用いた遺伝子治療

使用单个 AAV 载体进行基因组编辑的基因治疗

• 发表时间: 2022