Involvement of prostaglandin D2 in inflammatory chorioretinal disease

前列腺素 D2 参与炎症性脉络膜视网膜疾病

• 批准号: 21K09681
• 负责人: 蕪城 俊克
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09681/
• 关键词: プロスタグランジンD2; ぶどう膜炎; 加齢黄斑変性; 拮抗薬; 脈絡膜新生血管; プロスタグランジンＤ２; 実験的自己免疫性ぶどう膜炎; サイトカイン; 生理活性脂質; プロスタグランジンD2; ぶどう膜炎; 加齢黄斑変性; 拮抗薬; 脈絡膜新生血管; プロスタグランジンＤ２; 実験的自己免疫性ぶどう膜炎; サイトカイン; 生理活性脂質

本研究ではぶどう膜炎や加齢黄斑変性といった眼炎症疾患におけるProstaglandin D2(PGD2)の関与を解明することを目的としている。今年度は、PGD2受容体の１つであるDP2受容体のノックアウトマウス（DP２KO）および2種類のDP2アンタゴニスト(CAY10471とOC000459)を用いて、加齢黄斑変性の動物モデルであるマウスレーザー誘発脈絡膜新生血管（マウスCNV）モデルにおけるPGD2の役割を検討した。マウスCNVモデルの作成は、C57BL6マウスに麻酔後、散瞳下でダイオードレーザーを（50μm， 50msec，150mW）で視神経乳頭周囲に4～8発網膜光凝固を行った。1週間後に眼球摘出し、網膜をflat mountにしてCNVの大きさを測定した。8週齢、52週齢マウスどちらにおいても、DP2KOマウスはWTマウスに比べCNVサイズが減少していた。また56週齢の高齢マウスの方がCNVサイズの減少率が大きかった。2種類のDP2アンタゴニスト(CAY10471とOC000459)どちらを投与しても、CNVサイズが有意に減少した。DP2アンタゴニスト（OC000459）の投与量を減らすと、CNVサイズの減少効果は容量依存的に減弱した。またレーザースポット部位に遊走するマクロファージの数を、F4/80抗体による免疫染色で検討したところ、DP2KOマウスでは有意に減少していた。以上の結果から、マウスCNVモデルにおいてDP2の阻害により、マクロファージの病変局所への遊走が抑制され、CNVサイズを小さくすることが明らかとなった。今後は、PGD2がCNV形成に働いている機序を明らかにするために、レーザー部位におけるVEGF、MCP1などのサイトカインの発現解析、およびヒト培養網膜色素上皮細胞株であるARPE-19細胞を用いて、PGD2に対する反応を検討する予定である。

这项研究旨在阐明前列腺素D2（PGD2）参与眼部炎症性疾病，例如葡萄膜炎和年龄相关的黄斑变性。今年，我们使用DP2受体的基因敲除小鼠（DP2KO）调查了PGD2在小鼠激光诱导的脉络膜新生血管（小鼠CNV）模型中的作用，这是一种与年龄相关的黄斑变性的动物模型，以及两个DP2拮抗剂（Cay10471和OC000459）。为了创建小鼠CNV模型，在C57BL6小鼠中麻醉后，使用二极管激光器（50μm，50毫秒，150 MW）在Mydriatic Pupil下在视盘周围进行4至8个视网膜光凝。一周后，将眼球移开，并安装了视网膜以测量CNV的大小。与WT小鼠相比，在8岁和52周大的小鼠中，DP2KO小鼠的CNV大小降低。此外，在56周大的老鼠中，CNV尺寸降低了。处理两个DP2拮抗剂（CAY10471和OC000459）中的任何一个都大大降低了CNV的大小。减少DP2拮抗剂（OC000459）的剂量减轻了以体积依赖性方式减小CNV大小的效果。此外，当通过使用F4/80抗体进行免疫染色检查迁移到激光点位点的巨噬细胞数量时，发现DP2KO小鼠的巨噬细胞数量显着减少。以上结果表明，小鼠CNV模型中DP2的抑制会抑制巨噬细胞向病变局部迁移，从而降低了CNV的大小。将来，我们将研究PGD2在CNV形成中起作用的机制，该机制使用激光位点上的VEGF和MCP1等细胞因子，以及使用ARPE-19细胞（一种人类培养的视网膜色素上皮细胞系）对PGD2的反应。