Identification and expansion of sensory epithelial stem cell from human inner ear organoid

人内耳类器官感觉上皮干细胞的鉴定和扩增

• 批准号: 21K09638
• 负责人: 中村 高志
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09638/
• 关键词: 内耳オルガノイド培養; 内耳オルガノイド; 感覚上皮幹細胞; 内耳再生

引き続き遺伝子改変されたES細胞株を用いた内耳オルガノイド培養を行って実験を行っている。BMP4、LDN27219やSB431542といった小分子化合物の投与量とタイミングを微調整することで、昨年までと比較して内耳への誘導効率の改善に成功した。本培養系は多能性幹細胞の集合体である胚様体に始まり、非神経外胚葉、プレプラコード、耳上鰓予定領域と段階を経て分化させるが、各段階ごとに特徴的な遺伝子発現を免疫染色とqPCRを用いて確認した。しかし当初予定してた内耳感覚上皮の幹細胞マーカーをラベルした細胞株では、他の細胞株と比較して誘導効率が不良であり単離培養できるほどのGFP陽性細胞が得られておらず、方針の変更が必要な状況である。

我们正在继续使用转基因 ES 细胞系培养内耳类器官进行实验。通过微调BMP4、LDN27219和SB431542等小分子化合物的剂量和时间，他们成功地比去年提高了它们递送到内耳的效率。该培养系统从胚状体开始，胚状体是多能干细胞的集合，然后分化为非神经外胚层、前基板、耳上鳃区域，每个阶段都有其自己的特征性基因表达，并通过免疫染色得到证实。和qPCR。然而，最初计划的内耳感觉上皮标记干细胞标记的细胞系与其他细胞系相比，诱导效率较差，我们无法获得足够的 GFP 阳性细胞进行分离和培养，情况就是这样。改变是必要的。

项目成果

Generation and application of human inner ear organoid containing vestibular and cochlear like hair cells．

含有前庭和耳蜗样毛细胞的人内耳类器官的生成和应用。

• 发表时间: 2022
• 作者: Nishimura Goshi;Sano Daisuke;Arai Yasuhiro;Takahashi Hideaki;Hatano Takashi;Kitani Yosuke;Takada Kentaro;Wada Takashi;Hiiragi Yohei;Oridate Nobuhiko;Takashi Nakamura
• 通讯作者: Takashi Nakamura

聴覚・平衡覚機能再生に向けた幹細胞トランスレーショナルリサーチ ヒトオルガノイドモデルを用いた内耳研究の展望

用于听力和平衡功能再生的干细胞转化研究：使用人体类器官模型进行内耳研究的前景

• 发表时间: 2022
• 作者: Umatani M;Ogawa M;Hosokawa K;Kato C;Iwahashi T;Inohara H.;中村 高志
• 通讯作者: 中村 高志