子宮頸部異形成及び頸癌におけるFoxp4発現の意義と新規治療法の開発に関する検討

Foxp4表达在宫颈不典型增生和宫颈癌中的意义研究及新疗法的开发

基本信息

批准号：
21K09445
负责人：
中村充宏
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kanazawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09445/
关键词：
子宮頸部異形成子宮頸がん FOXP4 ELF3 NOTCH3 子宮頸部医形成 Foxp4 p16 子宮頸癌

项目摘要

これまで子宮頸部異形成の症例において免疫組織学的にFOXP4が発言しており進行に伴い発現が増強していることから、子宮頸部異形成の発症や進行癌への進展にFoxp4が関与している事が示唆された。今年度はメカニズムを検索することを目的とした。子宮頸部異形成の細胞であるW12においてFOXP4を発現していることを確認した。この細胞をshRNAシステムを用いて発現をノックダウン(KD)することによる変化を検討した。KDにて細胞増殖が抑制された。また形態学的には細胞形態、組織学的に分化が促進された形態を呈していた。更に分化マーカーであるKRT10、IVLの発現が上昇していた。これらの知見からFOXP4は異型細胞の扁平上皮分化を抑制しながら、細胞増殖を促進することでCIN進行に寄与していることが示唆された。次にW12の扁平上皮分化におけるFOXP4の下流遺伝子について検討した。FOXP4は転写抑制に作用するため、マイクロアレイ解析より、FOXP4のKDで発現が上昇する遺伝子に着目した。その結果、ケラチノサイト分化を調節するRIPK4シグナル経路やNotchシグナル経路に関連する遺伝子が上昇しており、FOXP4を介した分化調節に転写因子であるELF3やGRHL3、分化関連遺伝子であるNOTCH3について検討を行った。FOXP4KD細胞にsiELF3を導入し、ELF３をKDしたところ、脱分化様の細胞形態変化を認め、GRHL3、NOTCH3、IVL、TGM1、SPRR1の発現誘導は阻害された。またFOXP4KD細胞にsiNOTCH3を導入しNOTCH3をKDしたところ、脱分化様の細胞形態変化を認めHES2/5およびIVL発現の誘導が阻害された。以上より、FOXP4はELF3をDown regulationすることで、W12細胞の扁平上皮分化を抑制していることが示唆された。

到目前为止，在宫颈发育不良的情况下，FOXP4一直在免疫组织学上，并且表达随着进展而增加，这表明FOXP4参与了宫颈发育不良的发展，并发展为晚期癌症。今年，目的是寻找机制。已证实FOXP4在宫颈发育不良的细胞W12中表达。研究了通过使用shRNA系统击倒细胞的表达（KD）表达的变化。细胞增殖在KD中被抑制。此外，形态形式是形态学上增强的细胞形态和组织学上的分化。此外，增加了分化标记的KRT10和IVL的表达。这些发现表明，FOXP4通过在促进细胞增殖的同时抑制非典型细胞中的鳞状细胞分化来促进CIN的进展。接下来，检查了W12鳞状细胞分化中FOXP4的下游基因。由于FOXP4在转录抑制中起作用，因此小阵列分析的重点是其表达在FOXP4中增加的基因。结果，调节角质形成细胞分化的与RIPK4信号途径和Notch信号途径相关的基因升高，FOXP4介导的分化调节的转录因子和分化相关基因Notch3进行了转录因子。当Sielf3被引入FOXP4KD细胞中时，ELF3为KD时，观察到了降低的细胞形态，并且抑制了GRHL3，NOTCH3，IVL，TGM1和SPRR1的表达的诱导。此外，将Sinotch3引入了FOXP4KD细胞中，Notch3为KD，观察到了去分化的细胞形态，并抑制了HES2/5和IVL表达的诱导。从上面，建议FOXP4通过下调ELF3抑制鳞状细胞分化。