大腸癌肝転移に関与する癌細胞由来マイクロRNAの同定と制御するメカニズムの解明

结肠直肠癌肝转移中癌细胞来源的microRNA的鉴定及其调控机制的阐明

基本信息

  • 批准号:
    21K08756
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.58万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    2021
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2021-04-01 至 2024-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

本研究では、大腸がん肝転移の発生に関与する原発巣の癌細胞miRNAの同定と機能解析を行う。令和4年度は下記の研究を実施した。1. ステージIIIの原発腫瘍とステージIVの肝転移巣におけるこれら2つのmiRNAの発現レベルを調べた。具体的にはLCM法によってステージIII原発腫瘍並びにステージIV肝転移巣から癌細胞を採取し、qPCR実験をして、miR-106bとmiR-30bの発現レベルを調べた。2. 細胞レベルでmiR-106b及びmiR-30bによる細胞遊走と浸潤の影響をバリデーションした。昨年と同じようにmiR-106b低発現レベルを示すSW480にmiR-106b mimicを、miR-30b低発現レベルを示すLoVoにmiR-30b mimicを導入した。これらの細胞を使用して創傷治癒アッセイと浸潤アッセイを実行した。3. miR-106b及びmiR-30bが、がんの遊走と浸潤に影響のメカニズムを解明するため、RNA-シーケンス実験を実施した。具体的にはmiR-106b低発現レベルSW480にmiR-106b mimicを、miR-30b低発現レベルLoVoにmiR-30b mimicを導入し、これらの細胞サンプルのRNAを用いてRNA-シーケンスをして、miR-106b 及び miR-30bにより異常発現した遺伝子を調べた。4. miR-106b安定的な過剰発現細胞株を作成した。レンチウイルスを用いて、miR-106b安定的な過剰発現細胞株を作成した。
在这项研究中,我们将鉴定并功能分析原发癌细胞中参与结直肠癌肝转移发展的 miRNA。 2020财年,我们进行了以下研究。 1.我们研究了这两种miRNA在III期原发肿瘤和IV期肝转移瘤中的表达水平。具体而言,使用LCM方法从III期原发肿瘤和IV期肝转移瘤中收集癌细胞,并进行qPCR实验以检查miR-106b和miR-30b的表达水平。 2.我们在细胞水平验证了miR-106b和miR-30b对细胞迁移和侵袭的影响。与去年类似,SW480 中引入了 miR-106b 模拟物,显示出较低的 miR-106b 表达水平;LoVo 中引入了 miR-30b 模拟物,显示出较低的 miR-30b 表达水平。使用这些细胞进行伤口愈合和侵袭测定。 3.通过RNA测序实验阐明miR-106b和miR-30b影响癌症迁移和侵袭的机制。具体而言,将miR-106b模拟物引入具有低miR-106b表达水平的SW480中,将miR-30b模拟物引入具有低miR-30b表达水平的LoVo中,并使用RNA测序仪进行RNA测序。我们研究了这些细胞样本中 miR-106b 和 miR-30b 异常表达的基因。 4.创建稳定过表达miR-106b的细胞系。使用慢病毒创建稳定过表达 miR-106b 的细胞系。

项目成果

期刊论文数量(5)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Anti-VEGF and Anti-EGFR Antibody Therapy on T-Cell Infiltration and TCR Variation in Metastatic Colorectal Cancer
抗 VEGF 和抗 EGFR 抗体治疗对转移性结直肠癌 T 细胞浸润和 TCR 变异的影响
  • DOI:
    10.21873/anticanres.16197
  • 发表时间:
    2023
  • 期刊:
  • 影响因子:
    2
  • 作者:
    XU MING;TSUNEDOMI RYOUICHI;KIYOTANI KAZUMA;TOMOCHIKA SHINOBU;FURUYA KEI;NAKAJIMA MASAO;MATSUI HIROTO;TOKUMITSU YUKIO;SHINDO YOSHITARO;YOSHIDA SHIN;IIDA MICHIHISA;SUZUKI NOBUAKI;TAKEDA SHIGERU;IOKA TATSUYA;HAZAMA SHOICHI;NAGANO HIROAKI
  • 通讯作者:
    NAGANO HIROAKI
Serum CCL7 Is a Novel Prognostic Biomarker of Metastatic Colorectal Cancer
  • DOI:
    10.21873/anticanres.16139
  • 发表时间:
    2023-01-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    2
  • 作者:
    Chidimatsu, Hikari;Tsunedomi, Ryouichi;Nagano, Hiroaki
  • 通讯作者:
    Nagano, Hiroaki
Identification and elucidation of liver metastasis-associated miRNAs in primary Colorectal cancer
原发性结直肠癌肝转移相关 miRNA 的鉴定和阐明
  • DOI:
  • 发表时间:
    2021
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Ming Xu;Shoichi Hazama;Michihisa Iida;Ryouichi Tsunedomi;Hiroto Matsui;Nobuaki Suzuki;Satoshi Matsukuma;Yukio Tokumitsu;Yoshitaro Shindo;Shinobu Tomochika;Yuki Nakagami;Noriko Maeda; Shin Yoshida;Shigeru Takeda;Tatsuya Ioka ;Hiroaki Nagano
  • 通讯作者:
    Hiroaki Nagano
転移性大腸癌における T 細胞浸潤および TCR 変動に対する抗 VEGF
抗 VEGF 对转移性结直肠癌 T 细胞浸润和 TCR 波动的影响
  • DOI:
  • 发表时间:
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  • 通讯作者:
    永野浩昭
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  • 通讯作者:
    飯野 正光

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