The Significance and Mechanism of TF-FXa-Thrombin Signaling Cascade in Hepatic Ischemia Reperfusion Injury

TF-FXa-凝血酶信号级联在肝缺血再灌注损伤中的意义和机制

• 批准号: 21K08663
• 负责人: 栗山 直久
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08663/
• 关键词: 虚血再灌流障害; FXa阻害剤; トロンビン; エドキサバン; FXa; 肝虚血再灌流障害; 組織因子; 凝固Xa因子

肝虚血再灌流障害においては、血管内皮細胞障害による組織因子（tissue factor: TF）発現から始まり, 凝固第Xa因子 (FXa) を介して, Thrombin活性に至る。TF-FXa-Thrombin signaling cascadeが重要な役割を果たしている。よってマウス肝虚血再灌流障害モデルを用い実験を行い, TF-FXa-Thrombin signaling cascadeの制御による細胞保護効果について研究を行っている。In vivo実験： 60分間IRIモデルを用い、C57/BL6マウスにFXa阻害剤エドキサバンとコントロール（生食）を経口投与した。再灌流後4時間に肝臓および血液を採取した。エドキサバンを投与することでフィブリンの生成は有意に抑制された。エドキサバンは、コントロールと比較して肝障害及び組織学的損傷が有意に少なかった。エドキサバン投与群では、Ly-6G およびMAC-1 陽性細胞の浸潤が有意に減少し、PCRによりIL-6 およびTNF-α がコントロール群より著しく発現低下していました。IRI後のPAR-2発生は有意に増加したが、エドキサバン投与により肝臓組織におけるPAR-2、ERK 1/2発現が有意に抑制されていた。In vitro試験： ヒト肝類洞内皮細胞（SEC）の低酸素-再酸素化（H/R）モデルは、アネロパックジャーシステムを用いて以下のように確立した；低酸素条件（< 0.1% O2）90分、その後再酸素化4時間。H/R後、LDH細胞毒性およびPAR-2発現は有意に増加した。しかし、エドキサバンは、H/Rによって誘導されたLDH細胞毒性を有意に改善し、ERK 1/2の生成を抑制した。よって第Xa因子阻害薬であるエドキサバンは、微小血栓症の予防とFXa-PAR-2による炎症の抑制により、肝IRIを改善した。

在肝脏缺血再生疾病中，它始于由于血管内皮细胞疾病引起的组织因子（组织因子：TF）的表达，并通过凝结XA因子（FXA）导致凝血酶活性。 TF-FXA-凝血酶信号传导级联反应起着重要作用。因此，已经使用小鼠肝脏缺血性重击子进行了实验，并且正在研究TF-FXA-凝血酶信号级联的细胞保护作用。体内实验：使用IRI模型60分钟，C57/BL6小鼠被口服的FXA抑制剂Edoxavan和对照（RAW FOAD）。复发后4小时收集肝脏和血液。 Edoxavan的给药被显着抑制了纤维蛋白的产生。与对照相比，Edoxavan的肝脏损害和组织损害明显减少。在Edoxavan给药组中，与对照组相比，LY-6G和MAC-1阳性细胞的侵袭显着降低，PCR显着降低了IL-6和TNF-α的表达。 IRI后PAR-2的发生显着增加，但是Edxavan的给药被显着抑制了肝组织中的PAR-2和ERK 1/2表达。体外测试：使用Anero Pack jar系统（<0.1％O2）建立了人肝脏洞穴细胞（SEC）的低氧RE氧（H/R）模型。氧气4小时。 H/R之后，LDH细胞中毒和PAR-2表达显着增加。但是，Edoxavan显着改善了由H/R诱导的LDH细胞中毒，并抑制了ERK 1/2的产生。因此，来自Xa因子的抑制剂Edoxavan通过防止微孔和抑制FXA-PAR-2引起的炎症来改善肝脏IRI。