自己免疫性筋炎に合併する重症間質性肺炎の新規治療法の開発戦略

开发治疗自身免疫性肌炎相关严重间质性肺炎的新疗法的策略

• 批准号: 21K08478
• 负责人: 倉沢 和宏
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Dokkyo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08478/
• 关键词: 間質性肺炎; 皮膚筋炎; マクロファージ; 自己免疫疾患; 筋炎; 重症肺炎

膠原病に伴う肺疾患は生命予後という点から重要な合併症である．特に抗MDA5抗体陽性の急速進行性間質性肺炎（RP-ILD）に代表される膠原病合併難治性肺炎は予後不良であり，その治療法は確立していない．その病態にマクロファージの活性化が関与する可能性が報告されているが，その発症メカニズムは十分に解明されていない．本研究ではマクロファージにおける2本鎖RNA編集酵素ADAR1に注目し，膠原病合併RP-ILDにおけるADAR1機能異常の病理学的意義を明らかにする．本研究は，ADAR1をマクロファージ特異的に欠損させたLys-ADAR1-cKOマウスを利用して実施された．いままでの解析結果を以下に示す．（１）実験的自己免疫疾患モデルとしてToll-like receptor（TLR)7の刺激薬剤であるImiquimodの経皮的投与により誘導される自己免疫疾患モデルを作製．血清中抗dsDNA抗体は野生型とcKOマウスで検出されたが，有意差を認めなかった．（２）自己免疫疾患モデル成立後にTLR7刺激剤であるResiquimodとPolyI:Cを同時に経気道的に投与．病理学解析では野生型マウスに比較してcKOマウスでマクロファージ，好中球，リンパ球含む炎症細胞浸潤の増加を認めた．(3) コラゲナーゼ処理による肺由来の分散細胞についてFACS法による解析．WTと比べてｃKOマウスにおいて好中球，CD44＋CD4＋T細胞（メモリーT細胞)，ILC3細胞，NK細胞，およびマクロファージサブセットの中で単球由来肺胞マクロファージの増加を認めた．（4）cKOマウスにおいて血清中に約60~70%の陽性率で抗MDA5抗体がELISA法で検出された．以上よりマクロファージ細胞内のADARの低下は自己免疫疾患のILDの増悪病態を誘導する可能性が考えられた．

与胶原病相关的肺部疾病是生命预后的重要并发症。特别是，以抗MDA5抗体阳性快速进展间质性肺炎(RP-ILD)为代表的与胶原病相关的难治性肺炎预后较差，并且尚未建立治疗方法。有报道巨噬细胞的激活可能参与其病理过程，但其发病机制尚未完全阐明。本研究重点关注巨噬细胞中的双链RNA编辑酶ADAR1，阐明ADAR1功能障碍在RP-ILD并发胶原病中的病理意义。这项研究是使用 Lys-ADAR1-cKO 小鼠进行的，其中 ADAR1 在巨噬细胞中被特异性删除。到目前为止的分析结果如下所示。 (1)作为实验性自身免疫性疾病模型，我们创建了通过透皮给药咪喹莫特（一种Toll样受体（TLR）7刺激药物）诱导的自身免疫性疾病模型。在野生型和cKO小鼠中检测到血清抗dsDNA抗体，但没有观察到显着差异。 (2)建立自身免疫性疾病模型后，通过气道同时给予TLR7刺激剂Resiquimod和PolyI:C。病理分析显示，与野生型小鼠相比，cKO 小鼠的炎症细胞（包括巨噬细胞、中性粒细胞和淋巴细胞）浸润增加。 (3)用胶原酶处理的肺源性分散细胞的FACS分析。与WT相比，cKO小鼠的中性粒细胞、CD44+CD4+T细胞（记忆T细胞）、ILC3细胞、NK细胞以及巨噬细胞亚群中单核细胞来源的肺泡巨噬细胞均有所增加。 (4)ELISA法检测cKO小鼠血清中抗MDA5抗体，阳性率约为60-70%。由此认为，巨噬细胞中ADAR的减少可能会诱发自身免疫性疾病ILD的恶化。

项目成果

ADAR1 in bronchial epithelial cells is involved in the airway mucosal immune system in a mouse model of asthma

哮喘小鼠模型中支气管上皮细胞中的 ADAR1 参与气道粘膜免疫系统

• 发表时间: 2022
• 作者: Soejima Y;Kirino Y;Mitsuhiro Takeno M;Kurosawa M;Masaki Takeuchi M;Ryusuke Yoshimi R;Sugiyama Y;Ohno S;Yukiko Asami Y;Akiko Sekiguchi A;Igarashi T;Nagaoka S;Yoshiaki Ishigatsubo Y;Hideaki Nakajima H;Mizuki N.;田中彩絵
• 通讯作者: 田中彩絵