Mechanism of kidney injury associated with graft-versus-host disease after allogenic stem cell transplantation

同种异体干细胞移植后移植物抗宿主病相关肾损伤的机制

基本信息

批准号：
21K08410
负责人：
市川一誠
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Yamagata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、同種造血細胞移植後に発生する腎障害への、ドナー由来T細胞による免疫反応の関与を検討している。昨年度までの研究において、マウス骨髄移植の同種移植レシピエントでは、同系移植レシピエントに比べ、尿中腎障害マーカーの上昇、ドナーT細胞の増加、T細胞の活性化、腎組織障害の悪化を認める事が分かった。本年度は、さらに移植マウスの腎組織の蛋白同定、ならび細胞実験を行った。腎障害マーカーのNGALと、皮膚GVHDとの関連が示されているタンパクであるElafinが、同種移植マウスの腎臓で、同系移植マウスと比べて優位に発現が亢進していた。同種レシピエントの腎臓におけるElafinの局在を免疫染色で評価したところ、主に遠位尿細管上皮で発現していた。また、ドナーT細胞の細胞障害活性を検討するために、腎由来培養細胞をターゲットとして細胞傷害性Tリンパ球（CTL）アッセイを行った。T細胞を同種または同系の抗原提示細胞で刺激して活性化させ、腎血管内皮細胞または近位尿細管上皮細胞と共培養した結果、同種反応性T細胞による腎血管内皮細胞と尿細管上皮細胞のアポトーシスの誘導を認めた。これまでの実験では骨髄移植後2週間の時点で、腎臓における急性GVHDの評価を検討し、ドナーT細胞の浸潤、活性化、腎障害の悪化を示してきた。これらの変化が一過性に収束するか否かを検証するために、移植後6週後のレシピエントの腎臓を解析した。尿中のNAGは6週時点でも同種移植群で有意に高値であった。ドナー細胞数は移植後2週時点よりも減少していたが、活性化マーカー（CD69）や疲弊マーカー（PD-1）の発現は持続していた。

在这项研究中，我们正在研究供体来源的 T 细胞的免疫反应在同种异体造血细胞移植后发生的肾损伤中的作用。直到去年进行的研究表明，与同基因移植受者相比，小鼠骨髓移植的同种异体移植受者的尿肾损伤标志物增加，供体 T 细胞、T 细胞活化增加，肾组织损伤更严重。今年，我们进一步鉴定了移植小鼠肾组织中的蛋白质，并进行了细胞实验。与同基因移植小鼠相比，同种异体移植小鼠肾脏中的 NGAL（肾脏损伤标志物）和 Elafin（一种已被证明与皮肤 GVHD 相关的蛋白质）的表达显着增加。通过免疫染色评估Elafin在同种异体受体肾脏中的定位，发现它主要在远端肾小管上皮中表达。此外，为了检查供体 T 细胞的细胞毒性活性，我们针对肾源性培养细胞进行了细胞毒性 T 淋巴细胞 (CTL) 测定。通过用同种异体或同种抗原呈递细胞刺激来激活T细胞，并与肾血管内皮细胞或近端肾小管上皮细胞共培养，导致同种异体反应性T细胞诱导肾血管内皮细胞和肾小管上皮细胞诱导凋亡。。之前的实验评估了骨髓移植后2周肾脏的急性GVHD，并显示供体T细胞浸润、激活和肾损伤恶化。为了验证这些变化是否短暂收敛，我们在移植后 6 周分析了受体肾脏。 6 周时，同种异体移植组的尿 NAG 仍然显着较高。尽管与移植后 2 周相比，供体细胞的数量有所减少，但激活标记物 (CD69) 和耗竭标记物 (PD-1) 的表达仍在继续。

项目成果

期刊论文数量（3）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Allogeneic Donor T Cells Directly Attack Renal Endothelial and Epithelial Cells in Mice

同种异体供体 T 细胞直接攻击小鼠肾内皮和上皮细胞

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Ohtsuka J;Imai M;Fukumura M;Maeda M;Eguchi A;Ono R;Maemura T;Ito M;Yamayoshi S;Kataoka Y;Kawaoka Y;Nosaka T;Miyata Masahiro
通讯作者：
Miyata Masahiro

同種造血幹細胞移植後の腎障害と移植片対宿主病の関連

异基因造血干细胞移植后肾损伤与移植物抗宿主病的关系

DOI：
发表时间：
2021
期刊：
影响因子：
0
作者：
Yasuhiro Nakamura;Kenjiro Namikawa;Shusuke Yoshikawa;Yukiko Kiniwa;Takeo Maekawa;Osamu Yamasaki;Taiki Isei;Shigeto Matsushita;Motoo Nomura;Yasuo Nakai;Satoshi Fukushima et al.;宮田匡大
通讯作者：
宮田匡大