Tgm2-p62-p53 complex and autophagy regulation mechanism in chronic kidney disease

Tgm2-p62-p53复合物及慢性肾脏病自噬调控机制

• 批准号: 21K08221
• 负责人: 山田 英二郎
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K08221/
• 关键词: 糖尿病性腎臓病; Fyn; Tgm2; p53; オートファジー; 近位尿細管

【目的】糖尿病性腎臓病の障害部位として尿細管が注目され、またその成因に、autophagyが注目されている。我々はマウスモデルなどを用いて非受容体型チロシンキナーゼFynが代謝障害に関与する事、さらに筋肉ではautophagyを調節し筋肉量を規定している事を報告してきた。オートファジー調節機構は糖尿病性腎臓病に関与することが示唆されているため今回我々はFynの近位尿細管細胞における役割を検討し以下の結果を得た【結果】①Fyn過剰発現でautophagyの阻害、ノックダウンで活性化を認めた②骨格筋特異的Fynトランスジェニックマウスの筋肉では、autophagy調節分子であるTransglutaminase2(Tgm2)のチロシン残基がリン酸化されていた③in vitroでFynはTgm2を直接リン酸化した④293T細胞にてFynを過剰発現するとTgm2はリン酸化され、リン酸化部位をフェニルアラニンに置換(Tgm2-YF)するとされなかった⑤HK-2細胞でTgm2を過剰発現するとautophagy活性低下を認めTgm2-YFを過剰発現すると再活性化した⑥近年、腫瘍細胞でTgm2がp53とp62をシャントしp53のオートファゴゾームへの輸送を調節していると報告された。そのためHK-2細胞でTgm2をノックダウン/過剰発現したところ、p53タンパク量の低下/増加を認めた⑦マウス尿細管細胞ではTgm2,p53の局在はFynとともに一致し、さらに飢餓状態でこれらは基底膜状に移動した⑧高脂肪食マウスの近位尿細管細胞ではp53のタンパク発現上昇を認めた⑨同部位にてp62の発現は減少していることが示唆された

[目的] 肾小管作为糖尿病肾病的损伤部位而受到关注，而自噬作为其损伤原因而受到关注。使用小鼠模型，我们报道非受体酪氨酸激酶 Fyn 参与代谢紊乱，并通过调节肌肉自噬来调节肌肉质量。由于自噬调控机制被认为与糖尿病肾病有关，我们研究了Fyn在近端肾小管细胞中的作用，得到了以下结果：①Fyn的过度表达抑制自噬，Knock。在骨骼肌特异性 Fyn 转基因小鼠的肌肉中，自噬调节分子转谷氨酰胺酶 2 (Tgm2) 的酪氨酸残基被磷酸化。 Fyn体外直接磷酸化Tgm2 ④ 293T细胞中Fyn过表达磷酸化Tgm2，但未发现磷酸化位点被苯丙氨酸取代（Tgm2-YF） ⑤ HK-2细胞中Tgm2 Tgm2的过度表达降低了自噬活性，而Tgm2-YF的过度表达则重新激活了自噬活性。 ⑥最近有报道称，Tgm2在肿瘤细胞中分流p53和p62并调节p53向自噬体的转运。因此，当我们在 HK-2 细胞中敲低/过表达 Tgm2 时，我们观察到 p53 蛋白量的减少/增加 (7) 在小鼠肾小管细胞中，Tgm2 和 p53 的定位与 Fyn 的定位一致，并且此外，在饥饿条件下，在高脂肪喂养的小鼠近端肾小管细胞中观察到 p53 蛋白表达增加，并迁移至基底膜 ⑨ 表明同一区域 p62 表达减少。

项目成果

糖尿病性腎臓病の治療標的となり得る近位尿細管における新たなオートファジー調節機構

近曲小管中的新型自噬调节机制可能成为糖尿病肾病的治疗靶点

• 发表时间: 2021
• 作者: 植原良太;山田英二郎;岡田秀一;山田正信
• 通讯作者: 山田正信

Fyn is involved in the development of diabetic kidney disease by modulating autophagy

Fyn 通过调节自噬参与糖尿病肾病的发展

• 发表时间: 2022
• 作者: Ryota Uehara1;Eijiro Yamada;Kazuhiko horiguchi;Shunichi matsumoto;Satoshi Yoshino;Emi ishida;Aya Osaki and Masanobu Yamada
• 通讯作者: Aya Osaki and Masanobu Yamada