Dlk1による小腸発生段階における間質上皮crosstalkの解明

Dlk1 阐明小肠发育过程中的基质上皮串扰

• 批准号: 21K07976
• 负责人: 南 由佳
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07976/
• 关键词: DLK1; 小腸; 分化; オルガノイド; 発生; 胎児; 消化管

本計画では、昨年度、小腸発生段階における間質上皮crosstalkを解明をするために、まず、マウスの胎児期E14,5および成体期マウスの小腸より、間質初代培養細胞を採取した。培養液を、血清非添加培地に交換後、RNAを回収しRNAseqによる網羅的な発現解析を行った。その中で、NotchリガンドであるDlk1が胎児期でのread数が多い一方、成体期においては少ないことから、機能的な差をもたらしていると考えその解析対象とした。本年度は、胎児由来の小腸オルガノイドを採取培養し、胎児および成体由来の小腸間質細胞と共培養することで、小腸粘膜の分化成熟に与える影響を解析を行った。その結果、胎児由来の小腸間質細胞と共培養した場合においては、オルガノイドの形態が球形を維持し続けることが分かった。一方、単独で培養した場合は、培養期間が過ぎるにつれて、成体由来の小腸オルガノイドと同じように、buddingした形態へと変化していくことがわかった。このことは、培養系においても、上皮単独では時間の経過とともに、分化成熟方向へと性質が変化していることを示唆している。また、成体由来の小腸間質細胞と胎児由来の小腸オルガノイドを共培養した場合においても、単独培養と同じようにbuddingした形態へと変化していくことがわかり、胎児由来の小腸間質細胞は特異的な分化抑制シグナルを有していることが示唆された。続いてDLK1がその分化抑制機能に寄与しているか確認するため、siRNAでDLK1をKDした胎児小腸間質細胞と共培養したところ、その現象がキャンセルされた。

在该计划中，为了阐明去年小肠发育阶段的间隙上皮串扰，首先是从胎儿E14和5小鼠和成年小鼠小肠中收集的原发性间质培养细胞。用无血清培养基代替培养基后，收集RNA，并使用RNASEQ进行全面的表达分析。其中，DLK1是一种缺口配体，在胎儿阶段具有大量读数，但在成人阶段很小，这被认为是功能差异，并且是分析的主题。今年，我们分析了源自胎儿的小肠癌，并与源自胎儿和成人的小肠道基质细胞共培养对小肠粘膜分化成熟。结果，发现当与胎儿小肠道基质细胞共培养时，器官形态继续保持球形。另一方面，当单独培养时，发现随着培养时期的过期，形态会像成人衍生的小肠癌一样变为萌芽形式。这表明，即使在培养系统中，上皮的特性随着时间的流逝，沿分化成熟的方向变化。此外，当将成人衍生的小肠道基质细胞和胎儿衍生的小肠癌共培养时，它们变成了类似于单一培养物的芽形式，这表明胎儿衍生的小肠道基质细胞具有特定的分化抑制信号。接下来，为了确认DLK1是否有助于其抑制功能，我们将其与胎儿小肠道基质细胞共同培养，该胎儿带有kd的dlk1带有siRNA，并取消了这种现象。

项目成果

Risk and preventive factors of early‐onset colorectal neoplasms: endoscopic and histological database analysis

早发性结直肠肿瘤的危险因素和预防因素：内镜和组织学数据库分析

• DOI: 10.1111/jgh.16045
• 发表时间: 2022
• 期刊: Journal of Gastroenterology and Hepatology
• 影响因子: 4.1
• 作者: Arai Junya;Aoki Tomonori;Hayakawa Yoku;Niikura Ryota;Ishibashi Rei;Suzuki Nobumi;Tsuji Yosuke;Yamada Atsuo;Ushiku Tetsuo;Fujishiro Mitsuhiro
• 通讯作者: Fujishiro Mitsuhiro

Chemoprevention for Colorectal Cancers: Are Chemopreventive Effects Different Between Left and Right Sided Colorectal Cancers?

结直肠癌的化学预防：左侧和右侧结直肠癌的化学预防效果是否不同？

• DOI: 10.1007/s10620-022-07431-w
• 发表时间: 2022
• 期刊: Digestive Diseases and Sciences
• 影响因子: 3.1
• 作者: Arai Junya;Suzuki Nobumi;Niikura Ryota;Ooki Daisuke;Kawahara Takuya;Honda Tetsuro;Hasatani Kenkei;Yoshida Naohiro;Nishida Tsutomu;Sumiyoshi Tetsuya;Kiyotoki Shu;Ikeya Takashi;Arai Masahiro;Ishibashi Rei;Aoki Tomonori;Tsuji Yosuke;Yamamichi Nobutake;Hayaka
• 通讯作者: Hayaka

Stromal DLK1 promotes proliferation and inhibits differentiation of the intestinal epithelium during development

• DOI: 10.1152/ajpgi.00445.2020
• 发表时间: 2021-04-01
• 期刊: AMERICAN JOURNAL OF PHYSIOLOGY-GASTROINTESTINAL AND LIVER PHYSIOLOGY
• 影响因子: 4.5
• 作者: Ichinose, Mari;Suzuki, Nobumi;Woods, Susan L.
• 通讯作者: Woods, Susan L.