ニューロモデュレーションはαシヌクレイン脳内伝播に影響を及ぼすのか？

神经调节会影响 α-突触核蛋白在大脑中的传播吗？

基本信息

批准号：
21K07282
负责人：
下泰司
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Juntendo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

前年度と同様にパーキンソン病おける中枢神経内のαシヌクレイン（αsyn)伝播に対する、ニューロモデュレーションの影響の有無を確認するために、αsyn伝播モデル動物に対して、視床下核（STN）破壊術を施行したC57BL/6マウスを作製した。前年度は片側線条体にα-syn preformed fibrils (PFF) を定位的に注入（2mg/ml, 2.5 micro L）前に同側視床下核（STN）をイボテン酸（0.01 mg/ml, 2 micro L）で破壊しαsynの広がりを観察し、コントロール群（STNに生理食塩水注入群）と比較してαsynの皮質、黒質への広がりが抑制されていることを観察した(両群ともn=3)が、本年度はより実臨床に近い、αsyn PFFを片側線条体に注入24時間後にSTNをイボテン酸を用いて破壊し、解剖学的にαsynの伝播する領域を連続切片で確認した(n=3)。パラフィン切片を作成後、抗リン酸化シヌクレイン抗体(pSyn#64)を用いて免疫組織学的染色を行い、α-synの広がりを連続切片を用いてKeyence-Bz800のハイブリットセルカウントで定量的に計測を行った。その結果、コントロール群と比較してSTN破壊群において、αsynの皮質及び黒質への発現量の減少を認めた(p<0.0001)。これらの結果は、実臨床病態下でもSTNニューロデュレーションにおける、αsyn伝播の抑制可能性を示唆するものであった。現在、αsyn注入前後で、PDにおけるニューロモデュレーションのもう一つのターゲットとなる淡蒼球内節（GPi,げっ歯類ではEntopeduncular nucleus) を破壊しαsynの広がりの観察を行っている。

与去年一样，为了确认神经调节是否对帕金森病中枢神经系统内的 α-突触核蛋白 (αsyn) 传播有影响，我们对 C57BL/6 小鼠的丘脑底核 (STN) 进行了破坏。被生成。去年，同侧丘脑底核（STN）注射鹅膏宁酸（0.01 mg/ml，2.5 µ L），然后立体定向注射α-syn预制原纤维（PFF）（2 mg/ml，2.5 µ L）。单侧微纹状体。 L)被破坏，观察αsyn的扩散，与对照组（STN注射生理盐水组）相比，观察到αsyn向皮质和黑质的扩散受到抑制（两组均n= 3），但今年，αsyn将 PFF 注射到一侧纹状体后 24 小时，使用鹅膏蕈酸破坏 STN，并使用连续切片确认 αsyn 传播的解剖区域 (n=3)。创建石蜡切片后，使用抗磷酸化突触核蛋白抗体 (pSyn#64) 进行免疫组织学染色，并使用 Keyence-Bz800 混合细胞计数使用连续切片定量测量 α-syn 的扩散。结果，与对照组相比，STN破坏组皮质和黑质中αsyn的表达水平降低(p<0.0001)。这些结果表明，即使在实际临床条件下，在 STN 神经持续期间也有可能抑制 αsyn 传播。目前，我们正在通过破坏苍白球内部（GPi，啮齿类动物的内脚核）来观察 αsyn 的扩散，这是在 αsyn 注射之前和之后的 PD 神经调节的另一个目标。