TRIB1 promotes metastasis through transcriptional activation of EMT-related genes

TRIB1通过EMT相关基因的转录激活促进转移

• 批准号: 21K07095
• 负责人: 横山 隆志
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: University of Yamanashi
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07095/
• 关键词: TGF-β; Smad3; TRIB1; EMT; がん幹細胞; C/EBPα; SMAD3; 転移; MAPキナーゼ経路

昨年度の研究結果からTRIB1はC/EBPαの分解を介して細胞運動能やがん幹細胞性の促進に関わること考えられたため，これらの機能に関わるC/EBPα標的遺伝子の探索を行った．公的データベースにおいて，C/EBPαをノックダウンしたヒト乳がん細胞株のRNA-Seqデータセット (GSE132649) を用いて解析した結果，C/EBPαのノックダウンによりSOX2やWNT5B，β-Cateninの発現が上昇していた．そこでA549細胞とTRIB1 KO細胞にTGF-β刺激し，qPCRにより発現解析を行ったがTRIB1 KOによるこれらの遺伝子発現への影響は見られなかった．in vivoのがん転移能を調べるため，ルシフェラーゼを発現させたA549細胞とTRIB1 KOおよびTRIB1再導入細胞をそれぞれヌードマウスの尾静脈から移植し，IVISイメージングシステムによる解析を行った．移植4週間後において野生型とTRIB1再導入細胞は肺への定着が見られたが，TRIB1 KO細胞の定着は著しく減少しており，TRIB1が肺がん細胞の定着にも必須であることが示された．ヒト膵がん細胞株Panc-1においてTRIB1 KO細胞を作製したところ，A549細胞と同様にTRIB1 KOにより上皮細胞マーカーのE-cadherinタンパク質が増加した．このことから肺がんだけでなく，膵がんにおいてもTRIB1がEMTの制御に関わる可能性が考えられた．

根据去年研究的结果，据认为Trib1通过C/EBPα的降解参与了促进细胞运动和癌症干细胞的特性，因此我们搜索了参与这些功能的C/EBPα靶基因。在公共数据库中，使用击倒C/EBPα的人类乳腺癌细胞系的RNA-seq数据集（GSE132649）进行了分析，表明C/EBPα的敲低会增加SOX2，Wnt5b和β-catenin的表达。因此，通过TGF-β刺激A549细胞和Trib1 KO细胞，并通过qPCR进行了表达分析，但没有观察到Trib1 KO对这些基因表达的影响。为了研究体内癌症转移的潜力，从裸鼠的尾静脉中植入了表达荧光素酶的A549细胞和Trib1 KO和Trib1重新引入的细胞，并使用IVIS成像系统进行了分析。尽管发现植入后四个星期在肺中发现野生型和Trib1转子诱导细胞可显着降低，这表明Trib1对于在肺癌细胞定居也是必不可少的。当在人类胰腺癌细胞系Panc-1中制备Trib1 KO细胞时，Trib1 KO增加了上皮细胞标记物E-钙粘着蛋白，类似于A549细胞。这表明Trib1不仅参与了肺癌的EMT调节，而且还参与了胰腺癌的调节。

项目成果

生化学講座第2教室 - 山梨大学医学部

生物化学课程2室 - 山梨大学医学院

TRIB1 regulates TGF-β-induced cell motility through degradation of C/EBPα

TRIB1 通过降解 C/EBPα 调节 TGF-β 诱导的细胞运动

• 发表时间: 2022
• 作者: Okadome Y;Morinaga J;Yamanouchi Y;Matsunaga E;Fukami H;Kadomatsu T;Horiguchi H;Sato M;Sugizaki T;Hayata M;Sakaguchi T;Hirayama R;Ishimura T;Kuwabara T;Usuku K;Yamamoto T,Mukoyama M;Suzuki R;Fukui T;and Oike Y;横山隆志，齋藤 正夫，宮澤恵二
• 通讯作者: 横山隆志，齋藤 正夫，宮澤恵二