新興する高度多剤耐性エリザベスキンジア菌の新規薬剤耐性および病原因子の同定

新兴高度多重耐药性 Elizabethkindia 细菌中新型耐药性和毒力因子的鉴定

基本信息

批准号：
21K07031
负责人：
多田達哉
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Juntendo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

エリザベスキンジア属菌はフラボバクテリア綱フラボバクテリウム目フラボバクテリウム科に属するグラム陰性桿菌で自然界に広く分布し、日和見感染症を引き起こす。エリザベスキンジア属菌は染色体に3つの内在性β-ラクタマーゼblaB, blaCMEおよびblaGOBを保有する。その内、blaGOB及びblaBはカルバペネムを分解するカルバペネマーゼをコードする遺伝子として、blaCMEは基質拡張型β-ラクタマーゼ（ESBL）をコードする遺伝子であることが分かっている。これまでの解析から、2019年にネパールで分離されたエリザベスキンジア・アノフェリスは治療に有効な薬剤に対して最小発育阻止濃度（MIC）>64 ug/mlを示す高度汎薬剤耐性株であった。中でも、カルバペネム系薬、アミノグリコシド系薬およびコリスチン系薬に対するMICはすべて>512 ug/mlと超高度耐性を示した。本年度はネパールで分離されたカルバペネム高度耐性を示すエリザベスキンジア・アノフェリスからblaGOB、blaB及びblaCMEを用いてリコンビナントプロテインを作製し、中等度カルバペネム耐性を示す標準株のそれらと酵素活性を比較した。その結果、ネパール由来のGOBで有意なカルバペネム分解活性の上昇が認められた。両株におけるGOBアミノ酸配列の比較から、ネパール株由来のものはGOBの123番目のアミノ酸がグルタミン酸からアラニンに、133番目のアミノ酸がリジンからアスパラギンに変異していることが分かっている。これらの結果から、この2つのアミノ酸変異がネパール由来株の高いカルバペネム分解活性に影響を及ぼしている可能性が示唆された。さらに、ESBLとして知られているCMEにおいてもカルバペネムを効率よく分解することが明らかとなった。

Elizabethkinja广泛分布在自然世界中，其革兰氏阴性芽孢杆菌属于Flava细菌Flabba细菌，Flava细菌，并导致白天 - 日期感染。 Elizabethkinja在染色体上具有三个内部β-内酰胺酶Blab，Blacme和Blagob。其中，Blagob和Blab已被证明是一个编码底物扩展的β-内酰胺酶（ESBL）的基因，作为编码破坏碳青霉烯的基因。从先前的分析中，2019年在尼泊尔分离的伊丽莎白·斯金太亚anofferis是一种高度恐慌的库存，表明药物的最低生长（MIC）> 64 ug/ml。其中，所有用于碳青霉烯，氨基糖苷和collistin药物的麦克风均显示出> 512 ug/ml，显示出超高的耐药性。在这个财政年度，使用来自伊丽莎白的甲状腺反铁的Blagob，Blab和Blacme产生重组蛋白，该蛋白表明在尼泊尔分离的高度抗性，并将酶活性与标准菌株进行比较，表明标准菌株表明中度碳苯甲酸。结果，识别从尼泊尔衍生的GOB中的碳青苯分解活性显着增加。两家股份中GOB氨基酸序列的比较表明，尼泊尔股份源自谷氨酸到丙氨酸的第123氨基酸，而133rd氨基酸从赖氨酸到芦又突变。这些结果表明，这两个氨基酸可能影响碳青霉烯分解活性，这些活性源自尼泊尔。此外，很明显，Calva Penem在CME中有效拆卸，称为ESBL。