Identification of key molecules controlling portal vein invasion of hepatocellular carcinoma

控制肝细胞癌门静脉侵袭的关键分子的鉴定

• 批准号: 21K06935
• 负责人: 矢野 博久
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Kurume University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06935/
• 关键词: 肝細胞癌; 門脈侵襲; マイクロアレイ; マイクロダイセクション; 免疫染色; 門脈浸潤; バイオマーカー

肝細胞癌(HCC)の門脈浸潤(PVI)に密に関連する分子を同定し、HCCにおけるその発現や機能を解明し、更に、悪性度評価のバイオマーカーや治療標的となる可能性について検討することが目的である。昨年度実施予定の計画が遅れていたが、今年度には外科切除された6例の門脈侵襲(PVI)を伴う肝細胞癌(HCC)の主結節(MT)部、PVI部、非HCC(NT)部から、新しいレーザーマイクロダイセクション装置Leica LMD7を用いて組織を採取し、昨年よりも質の高い解析可能なRNAを抽出することができた。マイクロアレイによる網羅的遺伝子発現解析を依頼し、NT部、MT部とPVI部の遺伝子を比較して、NT部からPVI部に段階的に上昇する遺伝子の検索を行った。その結果、全症例で有意にPVI部において遺伝子発現が上昇している分子の同定は出来なかったが、少なくとも3症例で遺伝子発現が増加（27分子）あるいは低下（1分子）している分子を28分子同定した。その中で TCGA data base上でがんに関連する15分子に着目し、更にこれまでHCCとの関連性が報告されていない4分子（PHF12、STIM2、CDAN1、SUPT5Hについて検討を開始した。4分子中STIM2にまず着目して、51例のHCC症例をもちいて抗STIM2抗体とベンタナ社製の自動免疫染色装置で発現の検討を行っている。その結果、STIM2の発現とPVIとの間に何らかの有意な関係がある可能性が高いことが示唆されたため、今後、症例数を増やして、さらに検討を加える予定である。今年度は、進捗は遅れているもののマイクロダイセクションとマイクロアレイ解析によりPVIに関連する因子をいくつか同定し、検証を実施することができた。今後更に他の分子に関する検討や有意な関係が組織で同定された分子に関しては肝癌細胞株を使用した機能解析を進める予定である。

我们鉴定了与肝细胞癌 (HCC) 中门静脉侵犯 (PVI) 密切相关的分子，阐明了它们在 HCC 中的表达和功能，并研究了它们作为恶性肿瘤评估和治疗靶标的生物标志物的潜力。去年原定实施的计划被推迟，但今年在主结（MT）区、PVI区和非HCC中开展了6例伴有门静脉侵犯（PVI）的肝细胞癌（HCC）手术切除(NT) 使用新型激光显微切割设备 Leica LMD7，能够提取比去年更高质量的 RNA 进行分析。我们要求使用微阵列进行全面的基因表达分析，比较NT、MT和PVI区域的基因，并寻找从NT区域到PVI区域逐步增加的基因。结果，虽然我们无法在所有情况下鉴定出 PVI 区域基因表达显着增加的分子，但我们在至少 3 例中鉴定出基因表达增加（27 分子）或减少（1 分子）的分子。分子被鉴定。其中，TCGA数据我们在此基础上重点关注了15个与癌症相关的分子，同时也开始研究4个尚未被报道与HCC相关的分子（PHF12、STIM2、CDAN1、SUPT5H）。我们首先关注 TIM2，使用抗 STIM2 抗体和 Ventana Na 制造的自动免疫染色仪研究了 51 例 HCC 病例的表达。由于有人认为存在关系的可能性很高，因此我们计划增加病例数并进行进一步调查。今年，虽然进展缓慢，但显微解剖和微阵列分析已证实存在关系的可能性。我们能够识别和验证几个因素。我们计划进一步研究其他分子，并使用肝癌细胞系对组织中已识别出显着关系的分子进行功能分析。