スキルス胃癌と口唇口蓋裂の発症に関わるPLEKHA5の分子機能の解析

PLEKHA5参与硬质胃癌及唇腭裂发生发展的分子功能分析

基本信息

批准号：
21K06879
负责人：
山口英樹
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Sasaki Foundation
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06879/
关键词：
スキルス胃癌口唇口蓋裂 PLEKHA5 細胞間接着 E-cadherin

项目摘要

スキルス胃癌はびまん性浸潤、間質増生、腹膜播種をきたす予後不良の難治癌である。家族性スキルス胃癌はE-cadherinの変異により生じるが、変異保有者の一部は口唇口蓋裂を併発する。我々はスキルス胃癌の進展に関わる新規分子PLEKHA5を見出したが、驚くべきことにPLEKHA5が遺伝性口唇口蓋裂の原因遺伝子であることが報告された。従ってPLEKHA5は細胞間接着を制御し、その機能異常が両疾患の発症に関与すると推察された。そこで正常上皮の細胞間接着とスキルス胃癌におけるPLEKHA5の機能を解明することを目的として研究を行った。前年度までに、PLEKHA5はE-cadherinと共に細胞間接着部位に局在すること、アドヘレンスジャンクションやデスモソームに関連する多くのタンパク質と結合することが明らかになった。今年度は、詳細にPLEKHA5の局在機構を解析したところ、受容体チロシンキナーゼ下流で起こるチロシンリン酸化、N末端部に存在するWWドメインとPHドメインが細胞間接着部位への局在に重要であることを見出した。さらにCRISPR-Cas9によりPLEKHA5のノックアウト細胞を作製し、遺伝性口唇口蓋裂の家系で見つかったPLEKHA5変異の機能解析を進めている。またPLEKHA5のPHドメインについて結合脂質の探索を行なったところ、ホスファチジルセリンと強く結合することが明らかになった。ホスファチジルセリンはリサイクリングエンドソームに局在し、細胞内輸送で重要な働きをしている。実際に、PLEKHA5のノックダウンによりスキルス胃癌細胞において細胞内輸送の異常が確認された。従って、細胞間接着が喪失したがん細胞において、PLEKHA5は細胞内輸送に関与する可能性が示唆された。

技能胃癌是一种顽固性的静脉癌，预后不良，会导致嬉戏浸润，间质增加和腹膜播种物种。家庭技能胃癌是由E-钙粘蛋白的突变引起的，但是一些突变持有人的唇唇和pa嘴。我们发现了一个新的分子Plekha5，该分子参与了技能胃癌的进展，但令人惊讶地报道了Plekha5是裂口的遗传基因。因此，假定Plekha5控制细胞间接粘附，其功能异常与两种疾病的发作有关。因此，我们进行了研究，以阐明正常上皮细胞间接粘附的功能以及Plekha5在技能胃癌中的功能。到上一个财政年度，据透露，plekha5将定位在用电子钙粘着蛋白的细胞粘附中，并与许多与依从性连接和死亡男性有关的蛋白质结合。在这个财政年度，当我们详细分析了Plekha5的局部机制时，发生的酪氨酸氧化是在受体酪氨酸激酶，WW结构域和N端存在的pH结构域的下游的某物。此外，生产CRISPR-CAS9用于产生Plekha5基因敲除细胞，并促进了在遗传唇唇唇和口感的家族中发现的plekha5突变的功能分析。对Plekha5 pH结构域上结合脂质的探索表明，它与磷脂酰螺旋蛋白有很强的键合。 Hosfatidylserin位于回收末端酸中，在细胞内运输中很重要。实际上，Plekha5的敲低证实了技能胃癌细胞中细胞内转运的异常。因此，有人提出，plekha5可能参与丢失细胞粘附的癌细胞中细胞内转运。