ペプチドミクスを用いた妊娠高血圧症候群早期診断マーカーの探索

利用肽组学寻找妊娠高血压综合征的早期诊断标志物

• 批准号: 21K06808
• 负责人: 福冨 俊之
• 金额: $ 2.41万
• 依托单位: Kyorin University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06808/
• 关键词: 妊娠高血圧症候群; プロテオミクス; ペプチドミクス; 診断マーカー; メタボロミクス; アミノ酸分析; 血清

妊娠高血圧症候群 (HDP) は、5～7%の妊婦に発症する高血圧を主体とした疾患である。その重症化は、母体・胎児双方に重大な合併症の原因となる。HDPの病因・病態については、今なお、不明な点が多く、妊娠の中断以外には根治的な治療法がなく対症療法が中心である。その為、迅速な医療介入が発症及び病態悪化の抑制に重要である。しかし、現在、HDP発症を予知する有効な方法は無い。従って、本研究では、HDPの早期診断につながる有用な発症予知マーカーの創出を目的とし、血漿を対象としたペプチドの網羅的な解析を実施する。予備的検討及び前年度までに、HDP発症患者および非発症患者の少数血清試料を用いて血中ペプチドを対象としたペプチドミクス解析を行った。HDP血清で増減するいくつかのペプチド部分配列を同定し、有意な増加を示した血液凝固第V因子の部分配列1:VEVEQKと配列2:GLGCGKを同定した。しかし、第V因子の他の部分配列では有意な増加を示さなかった。本年度は、試料採取および解析手法の最適化に注力した。試料採取においては、所属大学医学部付属病院臨床検査部の全面的な協力を得ることが可能となり、多くの検体採取を可能とするプラットフォームを構築した。それに伴い、HDP発症患者および非発症患者の血液試料を血清から血漿試料へと変更した。解析手法の最適化においては、1.血漿試料を用いた分析の最適化、2.定量分析に用いるアイソバリックタグおよびタグを用いない分析法の最適化を行い、従来の質量分析法の1つであるショットガン法（Data dependent acquisition）に加え、MRM技術を応用したDIA（Data independent acquisition）法を用いることにより多くのタンパク質を同定可能とした、3.血漿中の遊離アミノ酸分析およびメタボロミクス解析の条件検討を行った。

子痫前期（HDP）是一种主要与5-7％的孕妇发生的高血压有关的疾病。病情的严重程度会给母亲和胎儿带来严重的并发症。关于HDP的发病机理和病理学仍然有许多未知数，除了中断怀孕以外，没有其他治疗方法，主要重点是有症状的治疗方法。因此，快速医疗干预对于防止病理的发作和恶化很重要。但是，目前没有有效的方法来预测HDP开发。因此，在这项研究中，将对等离子体中靶向的肽进行的全面分析，以创建有用的预测标记，从而导致HDP的早期诊断。初步综述，到上一年，使用少数HDP发作和非发病患者的血清样本对血液肽进行了肽分析。鉴定出HDP血清中的几个肽子序列增加或减少，并分别为1：VEVEQK和2：血液凝结因子V的GLGCGK V显示出显着增加。但是，因子V的其他子序列没有显着增加。今年，我们专注于优化样本收集和分析方法。在抽样方面，我们能够从大学医学院的临床实验室部门获得完全合作，并使我们能够收集许多标本的平台。因此，来自HDP发作和非发病患者的患者的血液样本从血清转换为血浆样本。在优化分析方法时，1。使用血浆样本优化分析，2。优化无等应标签的分析方法和用于定量分析的标签。除了传统的质谱法之一（数据依赖性采集）外，还可以使用DIA（数据独立的获取）方法使用MRM技术来鉴定许多蛋白质，以及3。进行游离氨基酸和代谢组学分析的条件分析。