Molecular mechanisms of duplicate resistance to FLT3 inhibitors in acute myeloid leukemia

急性髓系白血病FLT3抑制剂重复耐药的分子机制

基本信息

批准号：
21K06585
负责人：
片山和浩
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Nihon University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

FLT3阻害薬は、midostaurinやgilteritinib（Type I阻害薬）、quizartinib（Type II阻害薬）の３剤が急性骨髄性白血病治療薬として実臨床で使用されている。これらの単剤治療による薬剤耐性とFLT3の耐性変異が多数報告されているが、Type I阻害薬とType II阻害薬では耐性変異の箇所が異なる。このためType I阻害薬とType II阻害薬による逐次治療が可能であると考えられ、近年、その有効性が臨床試験で実証された。本研究はFLT3阻害薬による逐次治療後を見据え、重複耐性の予測と耐性機序の解明、耐性克服法の探索を目的とした。先行研究でFLT3-ITD陽性急性骨髄性白血病細胞MV4-11から樹立したquizartinib耐性細胞（QR細胞、D835V変異挿入）から、本研究でさらにmidostaurinにも耐性を示す重複耐性細胞（QMR細胞）を樹立した。また同時に、MV4-11細胞よりmidostaurin単剤の耐性細胞（MR細胞）も樹立した。2021年度までに、midostaurin耐性化においてFLT3遺伝子上に新たな変異は挿入されなかったこと、MR細胞とQMR細胞はいずれもmidostaurinに抵抗性を示すこと、MR細胞はFLT3を増幅していることを確認していた。2022年度はQMR細胞のquizartinib/midostaurin重複耐性の原因について検討した。FLT3とは異なる受容体（論文執筆中のため非公表）の増幅が確認され、バイパスシグナルによりmidostaurin抵抗性を示すことが予想された。しかし、このシグナルの阻害薬Xに対する感受性は、MV4-11とQMR細胞で変わらなかった。一方で、阻害薬Xとmidostaurinを共処理した場合に、QMR細胞と一部のMR細胞で相乗的な増殖抑制効果が認められた。したがって、MR細胞ではFLT3の増幅とバイパスシグナルが、QMR細胞ではバイパスシグナルがmidostaurin耐性の原因であり、重複耐性克服の標的になることが示された。以上の結果を基に、2022年度は所属学会で3件報告した他、現在は論文の執筆を進めている。

三种FLT3抑制剂，中端龙，吉尔特替尼（I型抑制剂）和Quizartinib（II型抑制剂）在实践中用作治疗急性髓样白血病的药物。由于这些单一疗法，已经报道了FLT3中的许多耐药性和耐药性突变，但是I型和II型抑制剂之间的抗性突变有所不同。因此，人们认为可以对I型抑制剂和II型抑制剂进行顺序治疗，并且近年来在临床试验中证明了其有效性。这项研究旨在预测抵抗力重叠，阐明电阻机制，并探索克服耐药性的方法，并着眼于使用FLT3抑制剂进行顺序治疗。在这项研究中，在先前的研究中，从FLT3-ITD阳性急性髓样白血病细胞MV4-11建立了重叠的耐药细胞（QR细胞，D835V突变插入），并且在先前的研究中还建立了对Midostostolin抗药性的重叠细胞（QMR细胞）。同时，还从MV4-11细胞中建立了中端龙单药耐药细胞（MR细胞）。到2021年，在Midostaurin抗性期间，没有将新的突变插入FLT3基因中，MR细胞和QMR细胞均对Midostorin抗性，并且MR细胞会扩增FLT3。在2022财年，研究了QMR细胞中Quizartinib/Midostaurin重叠抗性的原因。确认了与FLT3不同的受体的扩增（由于目前正在撰写论文而未发表），并预测旁路信号显示出米次陶龙的耐药性。但是，该信号对抑制剂X的敏感性在MV4-11和QMR细胞中没有差异。另一方面，当抑制剂X和Midostaurin共同治疗时，在QMR细胞和一些MR细胞中观察到协同抑制生长。因此，结果表明，MR细胞中的FLT3扩增和旁路信号，并且在QMR细胞中，旁路信号负责Midostaurin耐药性，并且是克服重叠抗性的靶标。根据上述结果，在2022年，我在学术会议上报告了三篇文章，目前正在撰写论文。