中枢神経障害下でのNG2グリアの挙動と髄鞘の再生機序の解明

阐明中枢神经系统损伤下NG2胶质细胞行为和髓鞘再生机制

基本信息

批准号：
21K06443
负责人：
畝川美悠紀
金额：
$ 2.5万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

脳は約 140 億個の神経細胞、その 10 倍のグリア細胞からなり、栄養を供給する脳血管と互いに連絡を取りながら神経グリア血管ユニット(neuro-glio-vascular unit; NVU)を形成している。本実験では分化・再生能が高く、髄鞘を形成するオリゴデンドロサイトや周皮細胞、アストロサイトに分化するオリゴデンドロサイト前駆細胞(OPC)として存在するNG2グリアに焦点を当て、慢性頭窓下の同一部位を長期間反復して観察することによって成体における細胞および髄鞘の形態、脳虚血などの病態時の形態学的変化、髄鞘再生を促進あるいは抗炎症作用を増強するメカニズムを検討し、病態改善のための薬剤の探索とその作用機序の解明を目的とする。NG2と高い共発現を有し、OPCおよびオリゴデンドロサイトに発現するSox10領域に蛍光タンパク質Venusを導入させた遺伝子改変マウスにTomita-Seylaz法による慢性頭窓を作成し、二光子顕微鏡を用いて長期間にわたって反復観察を行うことにより、細胞レベルでの変化を経日的に観察した。キレート剤であるクプリゾン混餌食(0.2％)を給餌することにより脱髄モデルを作成し、スルホローダミン101の腹腔内投与によって生体染色されるアストロサイトの形態学的変化を追跡する手法を確立した。観察終了後に脳を摘出し、蛍光細胞や神経細胞の撮像や解析の手法を検討中である。さらに、実験的脳梗塞モデルとして知られる中大脳動脈閉塞術を施行した病態モデルマウスを作成するため、基本的な手技を確立するとともに、線条体や大脳皮質における脳血流の変化と梗塞巣の形成との相関、行動異常を伴う神経症状の出現、施行時に発生して梗塞巣の形成に影響を及ぼすと考えられている大脳皮質拡延性脱分極(CSD)との関連についても検討した。

大脑由大约140亿个神经元，多10倍的神经胶质细胞组成，并形成与提供营养素的脑血管中的神经 - 基因血管单位（NVU）。该实验的重点是具有高分化和再生潜力的NG2胶质细胞，并且作为少突胶质细胞（OPC）存在，它们分化为形成髓磷脂，周细胞和星形胶质细胞的少突胶质细胞。通过长时间在慢性头部窗口下反复观察同一部位，我们研究成人细胞和髓鞘鞘的形态，诸如脑缺血等病理学期间的形态学变化以及促进髓磷脂再生或增强抗炎作用的机制，以及我们旨在搜索药物以提高病理学和澄清病理学的机制。使用tomita-seylaz方法在转基因的小鼠中创建了一个慢性头窗，该方法与NG2具有很高的共表达，并在OPC和少突胶质细胞中表达的Sox10区域中引入了荧光蛋白质金星，并在每日的级别上进行了两次级别的级别，在长时间的时间内进行了长时间的观察，并重复观察到了一定的时间。通过喂食螯合剂库酮污染物（0.2％）来创建脱髓模型，并建立了一种方法来跟踪通过腹膜内施用硫丹胺101染色的星形胶质细胞的形态变化。在完成观测后，将其删除和分析荧光细胞和分析的方法。此外，为了创建经历了大脑中动脉闭塞的鼠标模型，称为实验性脑梗塞模型，我们建立了基本技术，还检查了纹状体和脑质菌株的症状相关的脑血流的变化，外观的症状与外观相关性，外观的症状相关，脑皮质扩散去极化（CSD）被认为在应用时发生并影响梗塞病变的形成。

项目成果

期刊论文数量（22）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Time Series Tracking of Cerebral Microvascular Adaptation to Hypoxia and Hyperoxia Imaged with Repeated In Vivo Two-Photon Microscopy.

通过体内双光子显微镜重复成像脑微血管对缺氧和高氧适应的时间序列跟踪。

DOI：
10.1007/978-3-030-48238-1_51
发表时间：
2021
期刊：
Adv. Exp. Med. Biol.
影响因子：
0
作者：
Sugashi T.;Niizawa T.;Suzuki H.;Takuwa H.;Unekawa M.;Tomita Y.;Kanno I.;Masamoto K.
通讯作者：
Masamoto K.

塞栓糸を用いた中大脳動脈一過性閉塞術による大脳皮質および線条体の血流動態と梗塞形成

栓塞线暂时闭塞大脑中动脉后大脑皮层和纹状体的血流动力学和梗死形成