行動の性差を生み出す性的二型細胞群の機能解析

产生行为性别差异的性二态性细胞群的功能分析

• 批准号: 21K06414
• 负责人: 恒岡 洋右
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Toho University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06414/
• 关键词: 内側視索前野; Penk; 多重蛍光ISH; Creマウス; 性的二型; DREADD; AAV; 性行動

性的二形領域は神経の形態や細胞数、遺伝子発現などに顕著な性差がみられる領域だが、その機能を実証した研究はほとんどないが、その性質から性特異的な行動発現や生理機能の調節に深く関わる領域と考えられている。これまでの我々の予備的研究から複数の性的二形が見出されており、本研究ではその機能解明に取り組んでいる。我々が見出した内側視索前野の性的二形領域に特異的に発現する遺伝子として同定したもののうち、今年度は主にPenk陽性ニューロンの機能について検討した。本ニューロン群は性行動との関連が示唆されていることから、その他のニューロン群も含めてその機能について組織学的に検討した。本ニューロン群の機能についての示唆を得るため、最初に我々は超多重in situ hybridization（ISH）法を開発した。この手法は従来の多重蛍光標識が可能なISH-HCR(hybridization chain reaction)法をさらに発展させ、1回の標識で得たシグナルを消光し、再度染色を行うことで1切片もしくは1細胞から複数回の標識を行う手法である。性行動で神経活動が見られる内側視索前野の細胞群において、これまでも機能的示唆が得られていたエストロゲン受容体、性的二形のあるNeurotensin、Penk、Moxd1を共染色し、さらにVglut2やVgatといった神経伝達物質マーカー、神経活動マーカーであるc-Fosを染めることで性行動時に活動するニューロンを分類した。また、詳細な行動解析からB6Jマウス系統においてオスの性行動においては性的覚醒に二型があることを見出した。その結果、Penk陽性ニューロンは性行動の中でも性的覚醒に強く関連していること、抑制性であり、エストロゲン受容体を発現することなどが見出された。

性二态性区域是在神经形态，细胞计数，基因表达等中观察到重大性别差异的领域，但是尽管很少有研究证明其功能，但它们被认为是与性别特异性行为表达和由于其性质引起的生理功能的调节的领域。在我们以前的研究中已经发现了几种性二态性，这项研究正在努力澄清其功能。在我们确定的基因中，在上内侧皮层的性二态区域中特异性表达，今年我们主要检查了PENK阳性神经元的功能。由于已经建议这组神经元与性行为有关，因此在组织学检查了其他神经元（包括其他组）的功能。为了获得有关该神经元组功能的建议，我们首先开发了原位杂交（ISH）方法。该技术进一步开发了传统的杂交链反应（ISH-HCR）方法，该方法允许多个荧光标记，并通过淬灭一个从一个标记并休息的信号来从一个截面或细胞中执行多个标记。在一个在性行为中观察到神经活性的内侧皮层中的一组细胞中，我们共同染色了雌激素受体，神经素，penk和MoxD1，这些受体先前已在功能上提出，并且在性行为上也存在性染色神经元，这些神经元在性行为过程中通过染色神经释放剂标记在性行为中活跃，如vglut2和vglut2 and vgat 2 and c-fos，s Neur Marker and c-foserner neur。此外，详细的行为分析表明，B6J小鼠菌株中男性性行为的性唤醒存在二态性。结果，发现PENK阳性神经元与性行为之间的性唤醒密切相关，是抑制性和表达雌激素受体的。

项目成果

性と経験によって変化するマウス養育行動

老鼠的养育行为会根据性别和经验而变化

• 发表时间: 2022
• 作者: 恒岡洋右;船戸弘正;有村 奈利子;恒岡洋右
• 通讯作者: 恒岡洋右

自家蛍光消光装置

自发荧光猝灭剂

• 发表时间: 2021

Oxytocin Facilitates Allomaternal Behavior under Stress in Laboratory Mice

• DOI: 10.1523/eneuro.0405-21.2022
• 发表时间: 2022-01-01
• 期刊: ENEURO
• 影响因子: 3.4
• 作者: Tsuneoka, Yousuke;Yoshihara, Chihiro;Kuroda, Kumi O.
• 通讯作者: Kuroda, Kumi O.

Calcitonin receptor signaling in the medial preoptic area enables risk-taking maternal care

• DOI: 10.1016/j.celrep.2021.109204
• 发表时间: 2021-06-01
• 期刊: CELL REPORTS
• 影响因子: 8.8
• 作者: Yoshihara, Chihiro;Tokita, Kenichi;Kuroda, Kumi O.
• 通讯作者: Kuroda, Kumi O.

Gene duplication of C-type natriuretic peptide-4 (CNP4) in teleost lineage elicits subfunctionalization of ancestral CNP

• DOI: 10.1007/s00441-022-03596-y
• 发表时间: 2022-02-16
• 期刊: CELL AND TISSUE RESEARCH
• 影响因子: 3.6
• 作者: Katayama, Yukitoshi;Saito, Ami;Tsukada, Takehiro
• 通讯作者: Tsukada, Takehiro