Elucidation of the effect of extracellular stearic acid on intracellular transport

阐明细胞外硬脂酸对细胞内运输的影响

基本信息

批准号：
21K05427
负责人：
厚味厳一
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Teikyo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K05427/
关键词：
ステアリン酸リン脂質細胞内輸送 Akt GLUT4 脂肪酸脂肪細胞細胞膜

项目摘要

細胞外のステアリン酸の濃度変動が、細胞内の小胞輸送に与える影響を明らかにすることを目指してる。2022年度では、研究を進める上で鍵となる細胞内の小胞輸送の可視化に向けて検討した。AKTタンパク質に緑色蛍光タンパク質EGFPが付加されたタンパク質を発現するプラスミドベクターを作成し、細胞内のAKTタンパク質を可視化するツールを得た。また、遺伝子導入が困難である脂肪細胞に対して遺伝子導入条件を検討し、導入効率を高めることが出来た。次に、ステアリン酸がどのように細胞内輸送に関わるのかを明らかにするために、細胞内のステアリン酸量とインスリン応答性との関係を調べた。その結果、細胞外のステアリン酸濃度が継続的に高まることで、細胞内のステアリン酸の含有量が高まるだけではなく他の脂肪酸の含有量にも変化が生じ、その変化とインスリン応答性低下とのタイミングが一致することが分かり、ステアリン酸以外の脂肪酸の細胞内における変動にも着目する必要があることが明らかになった。さらに、ステアリン酸と立体構造が類似しているが二重結合を分子内に有するバクセン酸を用いて検討したところ、細胞外のステアリン酸の濃度を高めた時とは異なり、インスリン応答性は低下しなかった。この結果からも、単に細胞内でステアリン酸のような脂肪酸が増えただけではインスリン応答性が低下しない、すなわち細胞内輸送が影響を受けないことを示唆しており、ステアリン酸以外の脂肪酸の含有量の変化も併せて総合的に解析を進めていく必要性が強く示唆された。

目的是阐明细胞外硬脂酸浓度对细胞中沃尔维德斯转运的影响。在2022财年，我们检查了细胞中细胞的可视化，这些细胞是进行研究的钥匙。创建了一种质粒载体，该质粒载体表达具有绿色荧光蛋白EGFP的蛋白质，并创建了可视化细胞中Akt蛋白的工具。此外，还检查了很难引入基因的脂肪细胞的基因引入条件，并提高了引入效率。接下来，检查细胞中硬脂酸含量与胰岛素反应之间的关系，以阐明硬脂酸如何参与细胞内转运。结果，细胞外的硬脂酸浓度不断增加，不仅会增加细胞中硬脂酸的含量，而且会改变其他脂肪酸的含量，并发现变化和胰岛素反应。有必要专注于硬脂酸以外的脂肪酸细胞的波动。此外，当三维结构与硬脂酸相似，但是在分子中使用皮尼酸检查了双结合，胰岛素反应会降低，这与细胞外的硬脂酸的浓度不同。 t。从此结果，它表明，仅增加脂肪酸（例如细胞中的硬脂酸）不会降低胰岛素反应，即在细胞中，并且含有脂肪酸，而不是硬脂酸。将被全面促进。