過酸化トリアシルグリセロールの吸収機序解明から導く疾病との関連評価

通过阐明过氧化三酰甘油的吸收机制来评价与疾病的关系

基本信息

批准号：
21J12390
负责人：
高橋巧
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-28 至 2023-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

前年度の結果から、過酸化トリアシルグリセロール（TG）をラットの胃内へ投与すると、腸管内でTGの酸化（過酸化TGの生成）が亢進することが明らかとなった。そこで本年度は、過酸化TGをラットへ経口投与し、血液・組織（とくに、肝臓）中の過酸化TG量の変動を調査した。具体的には、①経口投与試験に用いるための過酸化TG標準品の大量調製、②血液および肝臓における抽出法・精製法の整備、③経口投与試験、これらに取り組んだ。①については、未酸化のTG（約10 g）を光酸化させた後、夾雑物を各種HPLCによって除去した。精製物をMS/MSにより解析したところ、目的の過酸化TGであることが確認され、十分量（約3 g）の標準品を確保した。②については、前年度の液-液抽出法および固相抽出法を改変し、抽出回収率が血液で約90％、肝臓で約55％であることを確認した。③については、ラットを1晩絶食した後、PBSあるいは過酸化TG標準品（過酸化物価が約10、50、100、500となるように調製したもの）を経口投与した。4時間後に解剖し、血液および肝臓を回収した。HPLC-MS/MS分析の結果、全ての群において過酸化TGのピークが確認された。一方、予想とは異なり、それらの検出量に差は殆ど見られなかった。そこで、過酸化TGの体内での速やかな代謝を想定し、代謝産物の一つとして還元物を新たに分析した。その結果、とくに血液から還元物が明瞭に検出され、興味深いことに、その量は過酸化TG投与量と正の相関関係にあることが分かった。前年度の結果も踏まえると、過酸化TGの腸管流入刺激はTGの酸化（過酸化TGの生成）を誘発するが、【その生成物の多くは速やかに代謝（還元等）され、血中過酸化TG量は一定に維持される】と推察された。今後、こうした現象の生理的意義を見極めていくことで、本研究領域の更なる発展が期待される。

上一年的结果表明，在大鼠胃中的三酰基甘油（TG）施用可增强肠道中的TG氧化（过氧化物TG的产生）。因此，今年，向大鼠口服过氧化物TG，以研究血液和组织（尤其是肝脏）中过氧化物TG量的变化。具体而言，我们研究了1）大规模制备过氧化物TG标准标准用于口服测试，2）改善血液和肝脏的提取和纯化方法，以及3）口服测试。关于①，将非氧化的TG（约10 g）进行光氧化，并通过各种HPLC去除污染物。通过MS/MS分析纯化的产物，并确认它是所需的过氧化物TG，并获得了足够量（约3 g）的标准产物。关于②，对上一年的液态液体提取方法和固相提取方法进行了修改，以确认血液的提取回收率约为90％，肝脏的提取率约为55％。关于③，将大鼠禁食过夜，然后将PBS或TG标准过氧化物产物（准备过氧化剂价格约为10、50、100、500）。 4小时后，收集血液和肝脏。 HPLC-MS/MS分析显示，所有组的过氧化峰Tg峰。另一方面，与预测不同，检测量几乎没有差异。因此，假设体内过氧化物TG的快速代谢，我们已将减少的产物新近分析为代谢产物之一。结果清楚地表明，特别是在血液中检测到降低的物质，有趣的是，该量与过氧化物TG的剂量正相关。考虑到上一年的结果，据估计，过氧化肠道Tg肠道流入刺激会诱导Tg的氧化（过氧化物TG的起源），但[其许多产物迅速代谢（还原等）和血液中过氧化物TG的量保持不变]。希望通过评估未来这些现象的生理意义来进一步发展该研究领域。