Bewegung der c-Untereinheiten in der H+-ATPsynthase aus E. coli bei ATP-Synthese und ATP-Hydrolyse (Zusatzantrag: Immobilisierung und Fluoreszenzmarkierung der H+-ATPsynthase aus E. coli mit Quantum dots)

大肠杆菌 H -ATP 合酶中 c 亚基在 ATP 合成和 ATP 水解过程中的运动(附加应用:用量子点固定和荧光标记大肠杆菌 H -ATP 合酶)

基本信息

项目摘要

H+-ATPasen sind zentrale Enzyme des Energiestoffwechsels in allen Zellen. Sie koppeln den transmembranen Protonentransport mit der Synthese von ATP und sie haben einen unge-wöhnlichen Mechanismus: Bei der Katalyse dreht sich ein Teil der Untereinheiten (Rotor) gegenüber den anderen Untereinheiten (Stator) wie bei einem Motor (Nanomotor). In diesem Vorhaben wird die Bewegung der membranintegrierten c-Untereinheiten gegenüber dem Stator (b-Untereinheit) und gegenüber den anderen Rotoruntereinheiten an einzelne Enzymmolekülen gemessen. Hierzu werden die verschiedenen Untereinheiten selektiv mit Fluoreszenzfarbstoffen markiert. Die Messung der Effizienz des Fluoreszenzresonanzenergietransfers zwischen diesen Fluorophoren an Einzelmolekülen erlaubt es zeitaufgelöst die Abstände und Abstandsänderungen zwischen den Untereinheiten bei der Katalyse (ATP Synthese, ATP Hydrolyse, Protonentransport) zu ermitteln. Ziel ist es, experimentell die Rotation der c-Untereinheiten im intakten membrangebundenen Enzym bei der ATP Synthese zu zeigen, Abstandsänderungen zwischen den Rotoruntereinheiten bei Synthese und Hydrolyse zu untersuchen und die Übergänge zwischen aktiven und inaktiven Enzymzuständen zu ermitteln.
艾伦·泽伦 (Allen Zellen) 的 H+-ATPasen sind zentrale Enzyme des Energiestoffwechsels。 gegenüber den anderen Untereinheiten (定子) wie bei einem Motor (纳米电机)。荧光团和单个分子在时间上的变化Abstände 和 Abstandsänderungen zwischen den Untereinheiten bei der Katalyse(ATP 合成、ATP 水解、质子运输)zu ermitteln。合成和水解是在旋转过程中进行的,并且是在酶作用和酶作用不作用的情况下进行的。

项目成果

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