Funktionelle Interaktionen von junctional adhesion molecule-A (JAM-A) bei Leukozytenrekrutierung und Atherosklerose

连接粘附分子-A (JAM-A) 在白细胞募集和动脉粥样硬化中的功能相互作用

• 批准号: 23773519
• 负责人: Professor Dr. Christian Weber
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Prophylaxe und Epidemiologie der Kreislaufkrankheiten
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2005-12-31 至 2009-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/23773519?language=en
• 关键词: Funktionelle; Interaktionen; von; junctional; adhesion

Junctional adhesion molecule-A (JAM-A) ist Mitglied der Immunglobulin-Superfamilie (IgSF) und an interzellulären Kontakten des Endothels im apikalen Bereich der tight junctions exprimiert. Hier geht es via der N-terminalen Domäne homophile Bindungen mit JAM-A auf Nachbarzellen ein und stellt über zytoplasmatische Wechselwirkungen mit PDZ Proteinen Verankerungen mit dem Aktin-Zytoskelett her. So kontrolliert JAM-A die endotheliale Permeabilität, wird aber bei entzündlicher Stimulation auf die Zelloberfläche umverteilt. Vorarbeiten haben die heterophile Interaktion von JAM-A (via der membran-proximalen Domäne) und leukozytärem ¿Lß2 Integrin (LFA-1) etabliert, sowie deren Beteiligung von Adhäsion und Transmigration von Lymphozyten. Im vorliegenden Antrag wird die exakte Lokalisierung relevanter Strukturbereiche und Bindungsepitope von LFA-1 ¿Lß2 und JAM-A für deren heterophile Interaktion, sowie die Ermittlung kinetischer Bindungsdaten angestrebt. Dies erfolgt durch Verwendung aufgereinigter (bzw. domänen-deletierter) JAM-A.lg Fusionsproteine und der offenen, d.h. hochaffinen LFA-1I Domäne in solid-phase Bindungsexperimenten und der Plasmonresonanz. Die Beteiligung Metallionen-bindender, saurer Aminosäuren und N-Glykosylierungssteilen wird über gezielte Punktmutagenese getestet. Die Bedeutung einer lateralen Interaktion von LFA-1 und leukozytärem JAM-A in eis wird mittels RNA Interferenz, Koimmunopräzipitation und Fluoreszenz- Resonanz-Energietransfer bei Substratkontakt bzw. Transmigration ermittelt. Durch live Videomikroskopie wird die Rolle einer lateralen Interaktion von JAM-A und LFA-1 in der transendothelialen Migration von Leukozyten unter Flußbedinungen überprüft. Die Beteiligung von JAM-A an Plaquebildung und -infiltration wird in Modellen der nativen Atherogenese mit Hitfe von apoE-/- Mäusen mit kompletter oder endothel-spezifischer JAM-A Deletion bzw. JAM-A-/- Knochenmarks-transplantierten apoE-/- Mäusen und durch Antikörperblockade in vivo untersucht. Schließlich wird getestet, ob JAM-A in löslicher Form im Blut zirkuliert und so als kardiovaskulärer Risikomarker etabliert werden kann. So lassen sich Erkenntnisse gewinnen zu strukturellen Voraussetzungen und zur funktionellen Rolle von JAM-A Interaktionen erwarten.

连接粘附分子-A (JAM-A) 是免疫球蛋白超家族 (IgSF) 的免疫球蛋白和内皮细胞间的联系，是紧密连接的基础。因此，控制 JAM-A 内皮细胞渗透性，并在 Zelloberfläche umverteilt 上进行刺激。 JAM-A（通过 der membran-proximalen Domäne）和 leukozytärem ¿ Lß2 整合素 (LFA-1) 的建立，可以帮助我们了解淋巴细胞的粘附和迁移。 Lß2 和 JAM-A 适合异性恋者的互动，因此会产生运动束缚。固相结合实验和等离子体共振中的 LFA-1I Domäne。轮回现场视频在 JAM-A 和 LFA-1 中横向滚动跨内皮细胞迁移在 Flußbedinungen überprüft 下。 JAM-A-/- Knochenmarks-transplantierten apoE-/- Mäusen und durch Antikörperblockade 体内 untersucht。请了解 JAM-A Interaktionen 的结构和功能。