Femtoliter-Arrays für die Analyse von Einzel-Molekül-Mechanismen von Enzymen

用于分析酶的单分子机制的飞升阵列

• 批准号: 199819232
• 负责人: Professor Dr. Hans-Heiner Gorris
• 金额: --
• 依托单位: Ústav Biochemie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2010-12-31 至 2016-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/199819232?language=en
• 关键词: Femtoliter; Arrays; die; Analyse; von

Die rasante Entwicklung neuer Einzel-Molekül-Techniken hat in den letzten Jahren Untersuchungen ermöglicht, die unseren Erkenntnishorizont, wie wir über biochemische Reaktionen denken, wesentlich erweitert haben. Die Beobachtung individueller Proteinmoleküle macht kinetische Details und Subpopulationen zugänglich, die in konventionellen Ensemble- Methoden verdeckt sind. Weil mit den meisten Einzel-Molekül-Techniken nur ein einzelnes oder wenige Proteinmoleküle untersucht werden können, sollen neue Arrays aus zehntausenden Femtoliter-Kammern durch Lithographie in Quarzglas hergestellt werden, um eine statistisch repräsentative Population aus tausenden individueller Enzymmoleküle parallel zu beobachten. Auf diese Weise lassen sich die Kinetik verschiedener Enzymklassen und Inhibitionsmechanismen analysieren. Abgeschlossene Femtoliter-Kammern bieten die einzigartige Möglichkeit, gekoppelte Enzymreaktionen auf Einzel-Moleküle-Ebene zu untersuchen. Durch die Verwendung in vitro-evolvierter Enzyme lassen sich neue Erkenntnisse zur molekularen Evolution gewinnen. Über den wichtigen Beitrag zur Grundlagenforschung hinaus soll der hohe Parallelisierungsgrad auf kleinstem Raum in einem Femtoliter-Array für eine miniaturisierte Sensorik verwendet werden.

Die Beobachtung individueller Proteinmoleküle macht kinetische 详细信息和Subpopulationen zugänglich, die in konventionellen Ensemble- Methoden verdeckt sind. Quarzglas hergestellt werden，um eine statistisch repräsentative Population aus tausenden individueller Enzymmoleküle parall zu beobachten. Einzigartige Möglichkeit，gekoppelte Enzymreaktionen auf Einzel-Moleküle-Ebene zu untersuchen。在一个微型传感器的飞升阵列中，我们采用了高平行度梯度。