基于Axin-Wnt信号调节基因探讨苗药金乌健骨方治疗膝骨关节炎的分子机制

项目介绍

AI项目解读

基本信息

批准号：
81760866
项目类别：
地区科学基金项目
资助金额：
34.0万
负责人：
唐芳
依托单位：
贵州中医药大学
学科分类：
H3108.中医内科学
结题年份：
2021
批准年份：
2017
项目状态：
已结题
起止时间：
2018-01-01 至2021-12-31

项目参与者：
节晓光；曹跃朋；陆道敏；张雄峰；曾苹；卢向阳；陈琳英；兰维娅；
关键词：
骨关节炎民族医学骨痹炎性关节病

项目摘要

Axin is a new found scaffold proteins, it can combine with Wnt signal to reduce the expression of β-catenin and mediate the maturation, proliferation, differentiation and apoptosis ofchondrocyte in osteoarthritis (OA). According to the latest study at home and abroad, Wnt/β-catenin signal pathway play an important role in the differentiation、proliferation and apoptosis of chondrocyte in knee osteoarthritis(KOA). KOA belongs to Lenggufeng in Miao medicine, beneath thetheory that congestion turns into disease and patency becomes healthy, we mainly use Miao medicine to compose Jinwujiangufang which has the effect of clearing sinew and scattering blood stasis. Through the early clinical and experimental study, we found the treating effect ofprescription is well, so we come up with a hypothesis that Jinwujiangufang could balance proliferation andproliferation of chondrocyte through regulate Axin-Wntsignal related gene, and then repair arthrosis. So based onWnt/β-catenin signal pathway and Axin regulate gene, we plan to build up KOA animal model and chondrocyte model of human beings to probe the molecular mechanism of using Jinwujiangufang from Miao medicine to treating osteoarthritis.

轴蛋白(Axin)作为一个新发现的构架蛋白，通过与Wnt信号相关调节基因结合，下调β-连环蛋白（β-catenin）的表达，介导骨关节炎（OA）软骨细胞的成熟、增殖、分化及凋亡。据最新国内外研究证实，Wnt/β-catenin信号通路在膝骨关节炎（KOA）软骨细胞的分化、增殖和凋亡中发挥重要作用。KOA属于苗医学“冷骨风”范畴，根据苗医学“壅塞为病，通达为康”的理论，治疗宜“通筋散血”，在此理论指导下以苗药为主组成金乌健骨方，经前期临床和实验研究取得了良好疗效。因此，课题组提出苗药金乌健骨方可能通过调控Axin-Wnt信号相关基因维持KOA软骨细胞增殖与凋亡的平衡，从而修复关节软骨的科学假说。并在前期研究基础上，构建KOA动物模型和人软骨细胞模型，以Wnt/β-catenin信号通路为靶向，Axin作为该通路的主要调节因子，探讨金乌健骨方治疗KOA的分子机制，具有重要的科学意义和应用前景

结项摘要

膝骨关节炎（KOA）发病机制尚未明确，研究发现Wnt/β-catenin信号通路与KOA发病密切相关。在前期基础上，本研究拟通过金乌健骨方调控Wnt/β-catenin治疗KOA。以动物和细胞实验进行研究。动物分组：分为空白组、模型组、中药低、中、高剂量组，细胞分组：空白组、中药低、中、高剂量组、美洛昔康组、氨基葡萄糖组。结果显示：PCR法测Wnt2a、Wnt4、Wnt5a、GSK-3β、cylinD1、MYC、MMP13、BMP2 mRNA相对表达量较正常组均升高，Axin、APC mRNA的表达量下降。Wb法检测织GSK-3β、β-catenin蛋白表达均较正常组升高，Axin表达较正常降低。ELISA结果回示，与空白组比较，模型组中Wnt3a、Wnt5a、GSK-3β、β-catenin、IL-6、IL-17及MMP-13含量显著升高，Axin表达降低，免疫组化结果：与空白组比较，模型组Wnt5a、GSK-3β、β-catenin、MMP13蛋白表达显著升高，Axin蛋白反之。以上研究结果表明在KOA中Wnt2a、Wnt3a、Wnt4、Wnt5a、cylinD1、MYC、MMP13、BMP2、IL-6、IL-17及GSK-3β、β-catenin高表达，APC、Axin呈低表达，通过治疗后Wnt2a、Wnt3a、Wnt4、Wnt5a、cylinD1、MYC、MMP13、BMP2、IL-6、IL-17及GSK-3β、β-catenin信号活性较模型组降低，APC、Axin较模型组升高，说明KOA作用机制与Wnt/β-catenin信号有关，且以金乌健骨方高剂量组治疗后表达接近正常组，说明金乌健骨方通过Axin为核心基因调节Wnt/β-catenin信号轴治疗KOA。