基于PKA/eNOS通路的艾灸激活TRPV1调脂通脉机制研究

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项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    81603695
  • 项目类别：
    青年科学基金项目
  • 资助金额：
    17.0万
  • 负责人：
    王桂英
  • 依托单位：
    东南大学
  • 学科分类：
    H3118.中医针灸学
  • 结题年份：
    2019
  • 批准年份：
    2016
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2017-01-01 至2019-12-31

项目摘要

Moxibustion consists of treatment of warm stimulation to the body. The existing research confirms that the mechanism of warming and promoting therapeutic effect from moxibustion is related to transient receptor potential vanilloid subfamily1 (TRPV1) .Although the subsequent effects of activating TRPV1 mechanism are unclear, hyperlipidemia treated effectively by moxibustion therapy is selected as object in this project . We plan to observe the influence of moxibustion stimulation at different temperature(38℃,45℃) on blood lipids and the structure and function of thoracic aortic endothelium in rats and mice model of hyperlipidemia. The aim is to analysise the relevance between the moxibustion-stimulation associated with TRPV 1 activation and the regulation of blood lipids and improvement of the vascular endothelial function. On this basis, the TRPV1 gene knockout (TRPV1-/-) mice are selected as comparison. We will also detect the endothelial function related factors,endothelial nitric oxide synthase (eNOS), protein kinase A (PKA) and the expression of dorsal root ganglion TRPV1mRNA of mice by using ELISA method, immunofluorescence and real-time Polymerase Chain Reaction (PCR) method,in order to study the mechanism that the TRPV1 actived by moxibustion through PKA/eNOS signal pathsis to regulate blood lipids and cleare the blood ,providing the experimental basis and theoretical guidance for further studies.
艾灸是通过对机体的温热刺激发挥其治疗作用，已有的研究证实艾灸的温通效应机制与瞬时受体电位香草酸亚型1（TRPV1）相关，但激活TRPV1后的相应作用机制尚不明确。本项目选用高脂血症这一艾灸治疗的有效病种，观察38℃和45℃两种不同温度艾灸热刺激对高脂血症模型大鼠、小鼠血脂及胸主动脉内皮形态结构、功能的影响，分析艾灸激活TRPV1调节血脂与改善内皮功能之间的联系；在此基础上，选用瞬时受体电位香草酸亚型1敲除（TRPV1-/-）小鼠做对照，采用ELISA法、免疫荧光法及实时荧光定量PCR法检测内皮功能相关因子、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、蛋白激酶A（PKA）及小鼠背根神经节TRPV1mRNA的表达，研究艾灸激活TRPV1通过PKA/eNOS信号通路调脂通脉的效应机制，从而为艾灸温通效应机制的深入研究提供实验基础和理论指导。

结项摘要

本项目首先确定38℃、45℃这两种温度艾灸热刺激对高脂血症模型大鼠血脂及胸主动脉内皮形态结构的影响，确认艾灸温度的不同所造成的调节血脂、改善内皮功能作用效应上的差异。其次观察艾灸热刺激激活TRPV1对高脂血症模型大鼠血清NO、eNOS以及内皮功能相关因子（CGRP、ET-1）的影响，确定艾灸调脂通脉作用与激活TRPV1的联系。最后研究艾灸对高脂血症模型小鼠PKA/eNOS信号通路的影响，分析艾灸调脂抗氧化扩血管的作用与激活TRPV1之间的联系。在此基础上，观察艾灸热刺激对小鼠背根神经节(DRG) TRPV1mRNA表达的影响，并利用TRPV1-/-小鼠作对照，进一步明确艾灸调脂通脉作用机制与激活TRPV1及PKA/eNOS信号通路的相关。. 本项目的研究过程和结果如下：课题组首先通过成熟的生化及形态学方法，明确45℃艾灸组热刺激对高脂血症模型大鼠血脂的调整优于38℃艾灸组，胸主动脉内皮HE染色结果也同样表明这一差异。其次明确45℃艾灸具有明显的调节血脂，保护血管内皮的作用，其调脂保护内皮的作用机制，与调节NO、eNOS、ET-1、CGRP、OX-LDL相关; 通过免疫组化法发现艾灸激活TRPV1调脂通脉与PKA，eNOS相关。在此基础上，观察艾灸热刺激对小鼠背根神经节(DRG) TRPV1mRNA表达的影响，并利用TRPV1-/-小鼠作对照，明确激活TRPV1与PKA/eNOS信号通路的相关，进一步探讨艾灸调脂通脉作用的TRPV1调控机制。. 基于本项目的研究，我们认为艾灸激活TRPV1调脂通脉，与PKA/eNOS通路有关，为艾灸温通效应机制的深入研究提供实验基础。.

项目成果

期刊论文数量（5）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
不同灸温对高脂血症小鼠血脂和 神阙穴皮肤形态及肥大细胞的影响
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2017
  • 期刊：
    艾灸; 温热刺激; 高脂血症; 肥大细胞; TRPV1
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    纵娇艳;王耀帅
  • 通讯作者：
    王耀帅
艾灸激活TRPV1对高脂血症小鼠胆固醇的影响
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2016
  • 期刊：
    时珍国医国药
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    高建芸;王桂英
  • 通讯作者：
    王桂英
45 ℃艾灸对高脂血症大鼠血脂及血清 ox-LDL、NO 的 影响
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2019
  • 期刊：
    中国针灸
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    苏方方;高建芸
  • 通讯作者：
    高建芸
神阙灸法治疗 EAT 模型小鼠的 疗效及机制初探
  • DOI：
    --
  • 发表时间：
    2017
  • 期刊：
    东南大学学报（医学版）
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    陈若暘;高建芸
  • 通讯作者：
    高建芸

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    王桂英
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  • 发表时间：
    2017
  • 期刊：
    辽宁中医杂志
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  • 作者：
    王桂英;石志强;班秀芬;李元奎;丁鑫;王琦
  • 通讯作者：
    王琦

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

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          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
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          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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